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目的 了解临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性及产超广谱β内酰氨酶,质粒介导的AmpC酶和氨基糖苷类修饰酶基因存在状况。方法 采用Microscan微生物鉴定仪,微量肉汤稀释法检测临床分离的肺炎克雷伯菌对21种抗菌药物的敏感性。采用聚合酶链反应(PCR)及测序技术分析超广谱β内酰氨酶,质粒介导的AmpC酶和氨基糖苷类修饰酶基因型。结果 肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感,对环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/舒巴坦、阿米卡星、头孢噻肟和头孢哌酮的耐药率分别为36.6%、38.3%、56.7%、63.4%、81.7%、86.7%、96.6、98.3%和98.3%,对其他药物的耐药率为100%。60株肺炎克雷伯菌全部扩增出TEM基因,有25株细菌检出CTX-M-Ⅰ群基因,有54株细菌扩增出DHA基因,有59株细菌检出共3种氨基糖苷类修饰酶基因,而SHV、PER和MIR(ACT-1)基因全部为阴性。且有21株肺炎克雷伯菌同时携带CTX-M-Ⅰ群、DHA、TEM和多种氨基糖苷类修饰酶基因。对其中4株细菌进行基因型测序,证实CTX-M-Ⅰ群扩增产物均为CTX-M-3;DHA扩增产物均为DHA-1;氨基糖苷类修饰酶基因分别为aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ和ant(3″)-Ⅰ。其中CTX-M-3(AY635141)、DHA-1(AY635140)已注册GenBank(括号内为GenBank注册号)。结论 临床分离的肺炎克雷伯菌为多重耐药菌,同时存在CTX-M-3型超广谱β内酰氨酶,DHA-1型质粒介导的AmpC酶和aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ以及ant(3″)-Ⅰ型氨基糖苷类修饰酶,尚未发现PER型及SHV型超广谱β内酰氨酶和MIR型质粒介导的AmpC酶。