反刍动物子宫内膜炎多发生于分娩后,是由病原微生物感染引起的炎症反应。子宫内膜炎会损害子宫内膜和卵巢功能,从而影响胚胎发育和附植导致动物繁殖力下降。反刍动物的子宫内膜炎发病率高且发病原因复杂,致病微生物和其毒力因子是导致子宫组织损伤,引起子宫内膜炎症反应的主要原因。脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）是子宫内膜炎致病菌大肠杆菌的主要致病因子,LPS进入机体能够激活TLR4/NF-κB通路和细胞焦亡通路。尽管LPS引起的炎症反应已有诸多报道,但是LPS引起反刍动物子宫内膜炎的机制仍不完全清楚。Ufmylation修饰是一种保守的翻译后类泛素化修饰,泛素折叠修饰因子1（ubiquitin folding modifier factor 1,UFM1）是Ufmylation修饰的底物结合蛋白。有研究证实,UFM1介导的Ufmylation修饰在LPS引起的炎症反应中发挥重要调控作用,但具体分子机制有待阐明。本研究以永生化山羊子宫内膜上皮细胞（goat endometrial epithelial cells,gEECs）为试验材料,分析UFM1对LPS诱导的gEECs炎症反应中TLR4/NF-κB通路和细胞焦亡通路的调节作用,为深入揭示Ufmylation修饰调控山羊子宫内膜炎的分子机制奠定基础。主要的研究结果如下:（1）使用5μg/m L浓度的LPS处理gEECs,qRT-PCR和Western blotting结果显示LPS激活了gEECs中的TLR4/NF-κB通路,促进该通路关键基因TLR4、My D88、TRIF、p65和NF-κB mRNA的表达;LPS处理显著增加了磷酸化p65蛋白的表达,上调细胞焦亡通路关键基因NLRP3、caspase-1和GSDMD mRNA的表达;上调pro-caspase-1、cleavage caspase-1、FL GSDMD和cleavage GSDMD蛋白的表达。以上结果证明LPS激活了gEECs中的TLR4/NF-κB和细胞焦亡通路。为了探讨TLR4/NF-κB通路和细胞焦亡通路间的关系,使用TLR4通路特异性抑制剂TAK-242抑制TLR4通路的激活,使用qRT-PCR技术筛选出最适TAK-242浓度为1μM,1μM的TAK-242能够显著抑制LPS引起的TLR4、p65、NF-κB mRNA的表达和NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA的表达,说明TLR4/NF-κB通路与细胞焦亡通路之间具有密切的联系。（2）使用5μg/m L浓度的LPS处理gEECs,qRT-PCR和Western blotting结果显示UFM1在LPS组中表达显著上调。在gEECs中分别使用si RNA和过表达质粒干扰或过表达UFM1,并添加LPS处理,检测UFM1对LPS诱导的TLR4/NF-κB通路和焦亡通路激活状态的影响。qRT-PCR结果显示,干扰UFM1后TLR4、p65的mRNA表达水平均显著上升,NLRP3、caspase-1 mRNA的表达水平也均显著上升;过表达UFM1后TLR4、TRIF、p65以及NF-κB的mRNA表达水平均显著性下降,NLRP3、GSDMD的mRNA表达水平也均显著下降。使用双重免疫荧光试验检测NF-κB的p65亚基的入核情况,结果显示LPS引起p65的核易位;与LPS组相比,干扰UFM1促进了p65核易位,过表达UFM1后抑制了p65核易位。LPS处理后,Western blotting结果显示干扰UFM1增加了pro-caspase-1、cleavage caspase-1和FL GSDMD蛋白的表达;过表达UFM1后cleavage caspase-1、FL GSDMD和cleavage GSDMD蛋白的表达下调。以上结果表明UFM1对LPS诱导的TLR4/NF-κB和细胞焦亡通路有抑制作用。综上所述,本研究表明Ufmylation修饰的底物结合蛋白UFM1,对LPS引起的山羊子宫内膜上皮细胞中的TLR4/NF-κB通路和焦亡通路的具有抑制作用。本研究为探索大肠杆菌引起的反刍动物子宫内膜炎的病理机制奠定了理论基础。