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一、目的本实验拟通过动物实验对甘油二酯(DAG)替代甘油三酯(TAG)能减少非酒精性脂肪肝的发生,或减轻脂肪肝的症状这一假设进行验证;为进一步揭示甘油二酯预防脂肪肝的作用机制,以及拓展其保健作用提供实验依据。二、方法清洁级成年健康Spraque-Dawley(SD)大鼠45只,按体重随机分为空白对照组,甘油二酯高脂组和甘油三酯高脂组,数量分别为10,17和18只。分别给予自配饲料,空白对照组饲料采用AOAC配方,各组脂肪供能占总能量百分比分别为18%,38.6%和38.6%。每4w给大鼠禁食取眼眶静脉血,测血TG,TC,ALT,AST和TBA。实验结束将大鼠禁食12h后,用10%的水合氯醛麻醉,眼眶静脉取血,血样室温静置2h后,2000rpm离心20min,取上清液待用。测定丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、甘油三酯、总胆固醇、胆碱酯酶、血清超氧化物歧化酶、丙二醛和肿瘤坏死因子-α。将血放干处死后立即取出大鼠肝脏,肾周脂肪,睾周脂肪及小脑,称重后取部分肝组织以10%甲醛溶液固定,做常规石蜡切块,并行HE染色,在光学显微镜下进行观察,其他组织放入液氮待用。三、结果1、与正常对照组相比,TAG组体重增长显著,而DAG组的体重增长无明显差异;二组身长尾长均较对照组增长(P <0.05);TAG组大鼠肝脏指数高于正常对照组,差异有统计学意义(P <0.05),与DAG组相比,肝指数增高非常显著,而DAG组与正常对照组间无显著差异;TAG组肾周脂指数较正常对照组增高(P <0.05),与DAG组相比增高非常显著(P <0.01);睾周脂指数情况类似,TAG组明显高于正常对照组(P <0.01),DAG组睾周脂指数与正常对照组相比无显著差异,但低于TAG组(P <0.05)。2、TAG组大鼠血糖与正常对照组相比无显著差异,而DAG组明显低于TAG组和正常对照组,与二者相比,差异均非常显著(P <0.01)。3、各组大鼠肝脏病理切片HE染色光镜观察:正常组肝脏组织结构完整,细胞索以中央静脉为中心向四周呈放射状整齐排列,肝小叶轮廓清晰,肝细胞呈多边形,细胞分界清,核圆而清晰,位于细胞中央,细胞质丰富;TAG组肝小叶结构破坏,肝索排列紊乱,呈点、片状坏死,肝窦扩张,肝细胞肿胀明显,胞体肿大或呈球形,胞浆透明,细胞质疏松,细胞质内可见大小不等,数量不一的圆形脂肪空泡,细胞核被挤到一侧,散在肝细胞嗜酸性变,小叶中央静脉周围和汇管区有炎细胞浸润;DAG组肝细胞浊肿明显减轻,有散在炎细胞浸润,肝细胞内偶有小脂滴。4、TAG组ALP高于DAG组(P <0.05)和正常对照组(P <0.01),DAG组ALP水平稍高于正常对照组,但是差异无显著性;2组GGT水平与正常对照组相比差异均非常显著,都低于对照组(P <0.01);HDL指标各组间均无差异,DAG组保护性的HDL有所增加; DAG组与正常对照组相比LDL有升高趋势,但差异无显著性,而TAG组相比正常对照组LDL升高有显著性(P <0.05)。5、大鼠血清ALT水平在实验4w时各组间无显著差异;第8w时TAG组ALT高于正常对照组(P <0.05),与DAG组相比,也有所增高(P <0.05);第14w时,TAG组ALT较对照组明显升高,差异非常显著(P <0.01),DAG组ALT较前也有升高趋势,但是与正常对照组相比差异无显著性,仍低于TAG组(P <0.05)。6、大鼠血清AST情况与上类似,在第8w时TAG组明显高于正常对照组(P <0.01),但与DAG组相比差异无显著性,DAG组AST较对照组升高(P <0.05);第14w时, TAG组AST仍高于对照组(P <0.05),但是DAG组AST与正常对照组间无明显差异。血清TC第8w时和14w时情况一样,TAG组均显著高于正常对照组(P <0.01),也明显高于DAG组(P <0.01)。第8w时,TAG组大鼠血清TG明显高于DAG组(P <0.01),14w时情况相同,此时TAG组也高于正常对照组TG水平(P <0.05)。TBA在第8w时,TAG组显著高于正常对照组(P <0.01),和DAG组(P <0.01);14w时,升高幅度稍有下降,差异均为P <0.05。7、TAG组大鼠血清SOD活性较DAG组降低(P <0.05),MDA水平较正常对照组明显升高(P <0.01),与DAG组相比也升高(P <0.05)。DAG组中,血清SOD活性呈升高趋势,血清MDA有下降趋势,但与正常对照组相比,均无显著差异。8、TAG组大鼠CHE在第8w时表现出高于DAG组(P <0.05),第14w时仍高于DAG组(P <0.05),同时与正常对照组相比,CHE水平也明显升高(P <0.05)。9、TAG组大鼠血清TNF-α较DAG组水平升高,差异非常显著(P <0.01),DAG组与正常对照组相比,血清TNF-α水平有下降趋势,但差异无统计学意义。10、TAG组大鼠血清PCIII水平明显高于DAG组,差异非常显著(P <0.01),反映肝脏有一定的纤维化。11、TAG组大鼠血清瘦素水平高于正常对照组(P <0.05),和DAG组(P <0.05),DAG组与正常对照组相比差异无显著性。四、结论1、高脂饮食可以成功制备NAFL大鼠模型,脂代谢、糖代谢紊乱是NAFL形成的重要机制。2、高剂量甘油二酯能维持大鼠体重、体脂、肝脏重量及形态在正常范围,因此长期正常剂量食用甘油二酯可能不会引起体重增加,体脂分布改变,以及肝脏功能改变。3、高剂量甘油二酯未引起大鼠血脂较正常对照组显著增加,因此长期正常剂量食用甘油二酯不至引起血脂变化。4、甘油二酯可以提高大鼠SOD活性,抑制大鼠脂质过氧化产物MDA含量的增加,有增强大鼠抗氧化能力的作用。5、甘油二酯对细胞因子TNF-α的分泌有抑制作用。6、甘油二酯不增加血清瘦素水平,不会引起机体瘦素抵抗。7、甘油二酯可以预防大鼠非酒精性脂肪肝。