目的探讨生物钟组分蛋白REV-ERB特异性激动剂SR9009对T98G细胞增殖、细胞活力、代谢活动及治疗时间的反应的影响,以阐明其发挥作用的潜在机制。方法体外培养人T98G细胞,用人Hep G2细胞株作为对照,分别与DMSO、SR9009以及硼替佐米(BOR)孵育处理后进行比较。MTT法测定SR9009处理后的T98G细胞活力,同时测量SR9009或BOR对T98G细胞活力影响的敏感效应时间段。将SR9009和BOR两种药物联合作用于T98G细胞,观察其协同作用。采用细胞行流式细胞术检测SR9009处理的T98G细胞的细胞周期。活细胞荧光示踪探针二乙酸荧光素(FDA)检测SR9009处理T98G细胞氧化还原状态。尼罗红染色共聚焦显微镜观察以及流式细胞术测定分析经SR9009或BOR处理的细胞中的LD水平,免疫组织化学检测谷氨酰胺合成酶、波形蛋白、GFAP、REV-ERBα。结果SR 9009处理的T98G细胞后,细胞活力显著降低,在20和40μM浓度孵育48,72 h的时候细胞活力下降最明显。SR9009(20μM浓度)处理T98G细胞48 h过程中,MTT测定分析细胞活力,结果显示出具有明显的药物处理时间依赖效应,其中18～30小时时间段抑制效果最高,表现为该时间段内细胞活力水平为最低(P<0.05)。BOR(500n M)处理的T98G细胞,在培养后的12-24h时间段内细胞活力为最低(P<0.01)。SR9009处理的Hep G2细胞,细胞活力同样显著降低。流式细胞术细胞周期分析显示,SR9009处理的T98G细胞58%处于G0/G1期,高于DMSO处理细胞的43%(P<0.01)。相反,经DMSO处理的细胞中,S期细胞比例高于经SR9009处理的细胞(P<0.05)。流式细胞术测量分析ROS水平发现,与DMSO对照组相比,SR9009处理的细胞中ROS水平显著降低(P<0.01)。而BOR(500n M)处理的T98G细胞的ROS水平升高(P<0.05)。此外,与DMSO组细胞相比,在SR9009(40μM)处理96h后的Hep G2细胞中,ROS水平也显著降低(P<0.01)。尼罗红染色检测发现,SR9009和BOR处理细胞的LD平均大小和含量均高于DMSO处理的细胞,而联合两种药物治疗表现出协同作用(P<0.01)。此外,与DMSO组细胞相比,SR9009处理后,Hep G2细胞LD水平也升高(P<0.001)。结论SR9009在T98G细胞中具有明显抗肿瘤活性,表现出明显的细胞毒性作用以及影响肿瘤细胞的代谢水平,降低肿瘤细胞生存率。其机制可能是SR9009通过调节细胞固有生物钟成分蛋白REV-ERB而实现。