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羊肚菌属真菌是珍贵的食药用菌,在世界各地均有分布,野生资源丰富。国内外研究结果表明,羊肚菌含有多种活性物质,主要包括羊肚菌多糖、氨基酸和脂肪类化合物,另外关于酶、吡喃酮抗生素、无机元素、色素、醇、甾醇和皂苷类等成分也有报道。羊肚菌的开发主要侧重在食用方面,尤其是对于羊肚菌的液体培养。药理学研究证明羊肚菌具有多种药理功能,如抗菌,抗氧化,美容增白,特别具有免疫调节作用。传统记载民间常用于治消化不良、痰多气短及其他呼吸道疾病。 该实验以羊肚菌子实体为研究材料,旨在采用多种植物化学的研究方法分离纯化小分子有机化合物。将羊肚菌子实体干品于阳光下暴晒2天,粉碎后,放入不锈钢带盖桶中,用95%医用乙醇室温下浸提48h,过滤,反复提取5次,合并提取液,在40℃条件下减压浓缩,得乙醇提取浓缩液。该浓缩液在室温下分两层,将上层液加水稀释后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,浓缩得到石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏、正丁醇浸膏和乙醇-水浸膏。预实验结果显示,羊肚菌各有机溶液层均含有有机酸类、萜类与甾醇类。采用系统溶剂分离法、两相溶剂萃取法、硅胶层析法、结晶法和重结晶法等多种方法和不同的分离工艺路线,主要针对羊肚菌乙酸乙酯浸膏进行逐级分离纯化,得到三种晶体——AB、E和F及2种结晶型物质——G和H。利用半制备型高效液相色谱在适当条件下对固体G进行进一步分离和纯化,分别得到单体G;利用氯仿-甲醇重结晶对粗晶F、H进行进一步纯化得到单体F、H。其次,在石油醚层得到一种脂溶性晶体Ⅰ,经环己烷—乙酸乙酯反复重结晶后得到晶体Ⅰ。另外,采用水蒸气蒸馏法对羊肚菌提取液石油醚层的挥发油成分进行了提取。 经核磁共振谱(包括碳谱和氢谱)、质谱、高效液相色谱、薄层色谱等方法分析鉴定并结合标准图谱对照,确定化合物G为尿嘧啶,化合物Ⅰ为豆甾醇和β-谷甾醇的混合物,质谱图丰度显示以豆甾醇为主。化合物H为长链饱和脂肪烃物质1-苯基-十五烷烃。这些物质均为首次从羊肚菌子实体中分离得到。另外,对两种不纯的晶体用高效液相色谱(分析柱)进行了纯度鉴定。 通过GC-MS分析了石油醚层挥发油的化学成分,测定结果表明挥发油中主要含有硬脂酸乙酯,油酸乙酯,亚油酸乙酯及一些有机酸类物质,约占总含量的50%;同时样品质谱数据也给出了许多未知的成分。