3-MCPD棕榈酸双酯在小型猪体内的药代动力学及组织分布规律研究

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氯丙醇酯的污染近年来逐渐引起国内外关注。其中污染水平最高、最典型的是3-氯-1,2-丙二醇脂肪酸酯(3-MCPD酯),目前被发现广泛存在于精炼食用油、面包、糕点、饼干、炸面圈、婴幼儿奶粉、咖啡等含油脂食品中。3-MCPD酯目前被国内外研究学者认为是一种潜在的危害因子,其在肠胰脂酶作用下能水解为非遗传性且具有肾脏、睾丸毒性的致癌物3-MCPD。氯丙醇酯引起的健康风险不容忽视,2008年,JECFA已将其列为优先评估的食品污染物。本研究以近交系小型猪为动物模型,利用药代动力学和组织动力学方法初步研究了3-MCPD棕榈酸双酯在小型猪体内的代谢和组织分布规律;同时,优化了当今国内外食品中氯丙醇检测的主流方法,建立了食品中氯丙醇类物质的在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱(Online GPC-GC-MS/MS)非衍生化的分析方法。1.3-MCPD棕榈酸双酯在小型猪体内的药代动力学及组织分布规律研究药动组小型猪单剂量灌胃42.56 mg/kg bw 3-MCPD棕榈酸双酯(相当于8.0mg/kg bw 3-MCPD),采取同位素稀释-高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法和气相色谱-质谱(GC-MS)衍生化法测定0~48 h血液样本中3-MCPD棕榈酸双酯的含量及代谢产物中3-MCPD的含量。组织分布组小型猪单剂量灌胃37.24mg/kg bw 3-MCPD棕榈酸双酯(相当于7.0 mg/kg bw3-MCPD),以UHPLC-MS/MS、GC-MS法分别测定0~48 h心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、脂肪、肠及肠内容物、胆汁、尿液和血液样本中原型物3-MCPD棕榈酸双酯和代谢产物3-MCPD的含量。采用Phoenix Winnonlin 6.3药代动力学软件处理小型猪血液样本及各组织样本中3-MCPD平均浓度-时间数据,并进行非房室模型分析。3-MCPD棕榈酸双酯在小型猪体内迅速分布于各组织中,十二指肠为其主要吸收部位,回肠作为其主要代谢场所,3-MCPD棕榈酸双酯消除速率较快,48 h基本降至定量限附近。3-MCPD吸收进入血液后迅速与心脏、肝脏、脾脏、肺脏等组织进行物质交换,达到平衡状态。与已有大鼠体内3-MCPD棕榈酸双酯报道相比,不同种属间动物代谢有较大的差异。2.食品中氯丙醇类物质的(Online GPC-GC-MS/MS)非衍生化法研究本研究利用Online GPC-GC-MS/MS技术建立了食品中氯丙醇类物质测定的非衍生化的检测方法。样品中加入氘代同位素内标后,采用ExtrelutTM NT硅藻土进行固相支持液液萃取净化,用正己烷淋洗去除非极性杂质,以乙酸乙酯萃取目标物,萃取液经浓缩后直接采用Online GPC-GC-MS/MS测定。4种氯丙醇在0.005~1.0 mg/L线性范围内相关系数良好(R2>0.999),检出限范围均在0.002~0.005 mg/kg之间,定量限在0.005~0.01 mg/kg之间。以空白酱油样品为代表性基质的0.02、0.1和0.5 mg/kg 3个水平的加标回收率和相对标准偏差(RSD,n=6)分别为94.8%~106.3%(2.2%~10.3%)、91.8%~108.8%(2.1%~10.6%)、83.1%~109.4%(1.3%~9.4%),说明该方法的精密度和准确性均良好。采用本方法分别对酱油、水解植物蛋白液(粉)、料酒、鸡精、面包和糕点样品进行检测,均得到了满意的测定结果。
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