【摘 要】
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适时抽薹对大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)生产和育种工作至关重要。创制各种与抽薹有关的突变体,克隆突变基因,解析其突变导致大白菜抽薹性状发生改变的原因,是研究大白菜抽薹开花分子调控机制的重要途径。在本研究中,利用EMS诱变技术获得了一个稳定遗传的大白菜早抽薹突变体,继而利用Mut Map技术,定位了突变基因,明确了其表达模式,鉴定了候选基因BrPMEI51的功能,
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适时抽薹对大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)生产和育种工作至关重要。创制各种与抽薹有关的突变体,克隆突变基因,解析其突变导致大白菜抽薹性状发生改变的原因,是研究大白菜抽薹开花分子调控机制的重要途径。在本研究中,利用EMS诱变技术获得了一个稳定遗传的大白菜早抽薹突变体,继而利用Mut Map技术,定位了突变基因,明确了其表达模式,鉴定了候选基因BrPMEI51的功能,相关结果如下:1.相较于野生型‘FT’,早抽薹突变体在秋季栽培时没有明显的结球现象,直接抽薹。遗传分析表明:该突变体的早抽薹性状是由单隐性核基因控制,命名为ebm9(early bolting mutation gene 9)。2.利用野生型和突变体构建了F2分离群体,鉴定出分离群体中的早抽薹单株构建混池,对突变体、野生型和混池分别进行基因组重测序,借助Mut Map策略定位突变位点,最终将突变位点定位在A02号染色体1532588bp处,该位点位于果胶甲酯酶抑制子基因BrPMEI51(Bra A02g003140.3C)启动子上,发生了单碱基突变(C→T)。3.qRT-PCR分析表明,在突变体ebm9和野生型‘FT’上,BrPMEI51基因的表达量类似,但在突变体ebm9上花的表达量高于野生型;GUS组织化学染色法说明,该基因在根、花序、叶片中均有表达;亚细胞定位结果显示,BrPMEI51蛋白分布在细胞质中,所位于的具体细胞器需要进一步研究。4.构建了BrPMEI51过量表达载体,并将其转入哥伦比亚生态型(col-0)拟南芥中。结果显示,相对于野生型,过表达BrPMEI51的拟南芥植株抽薹显著提前,因此推测BrPMEI51基因功能与植物抽薹性状密切相关。
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