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目的:头颈部鳞状细胞癌(Head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)是头颈部常见恶性肿瘤,易转移,致死率高。肿瘤干细胞(Cancer stem cells,CSCs)是肿瘤组织中数量极少的具有自我更新能力和多种分化潜能的一类细胞。肿瘤微环境中还存在一类特殊的间质细胞即癌相关成纤维细胞(Cancer-associate fibroblasts,CAFs)。本实验目的为检测HNSCC中CSCs的分布情况及其与CAFs数量的相关性,进而探讨CAFs在体外与HNSCC细胞分化的相关性。材料方法:本研究选取17例HNSCC临床病理组织制作石蜡切片,采用免疫组织化学染色的方法检测组织中CD44、脱氢酶1(Aldehyde dehydrogenase-1,ALDH1)、CD133和α-SMA的表达情况,免疫组织化学染色结果用ImagePro Plus6.0软件进行量化分析,所得实验数据采用SPSS17.0软件进行统计分析。选取两种HNSCC细胞和CAFs,其中两种HNSCC细胞分别为:UM-SCC6和SCC原代细胞(PSCC)。PSCC和CAFs分别从HNSCC手术组织中新鲜提取。本研究对两种HNSCC细胞分别应用三种不同培养条件:常规培养、CAFs条件培养基培养和与CAFs共培养,用细胞免疫荧光染色的方法检测三种培养条件下HNSCC细胞中CD44和ALDH1的表达。CAFs条件培养基收集自处于对数生长期的CAFs的细胞混悬液,离心去细胞沉淀后取上清液。HNSCC细胞与CAFs共培养时细胞的接种比例为HNSCC:CAFs=1:10。结果:(1)对17例HNSCC病理组织进行免疫组织化学染色发现,CD44主要表达在细胞膜上,随着恶性程度的增强,表达逐渐增多,差异具有统计学意义(P<0.05);ALDH1主要表达在肿瘤细胞胞浆内,表达量与肿瘤分化程度无统计学差异(P>0.05);CD133在17例HNSCC病理组织中均未见表达。α-SMA主要表达在肿瘤间质细胞胞浆内,随着肿瘤恶性程度的增强,表达逐渐增多,差异具有统计学意义(P<0.05);CD44与α-SMA的表达量之间正相关(r=0.647,P<0.05),ALDH1与α-SMA的表达量之间无相关性(P>0.05)。(2)细胞免疫荧光染色结果显示普通培养条件下UM-SCC6和PSCC均未见CD44和ALDH1的表达。在添加CAFs条件培养基和与CAFs共培养的条件下,UM-SCC6和PSCC中均可见部分细胞表达CD44和ALDH1。结论:(1)在HNSCC组织中,CAFs与CSCs的数量正相关。(2)CAFs在体外与HNSCC细胞的分化相关。