真养产碱杆菌112R<,4>的二羧酸单酰胺水解酶及其基因克隆与表达研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaojuan2582
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在一株具有环酰亚胺转化活性的微生物--真养产碱杆菌112R<,4>中发现了一种特异性的二羧酸单酰胺酰胺水解酶(半酰胺酶),它催化环酰亚胺代谢的第二步反应,将二羧酸单酰胺水解为二羧酸和氨.重组质粒pHWY304带有与环酰亚胺水解相关的DNA片段,从该质粒出发,通过亚克隆获得了带有半酰胺酶基因的1672bp的DNA片段,并进行了序列测定.真养产碱杆菌112R<,4>的半酰胺酶基因在大肠杆菌中得到了表达.对重组酶的部分酶学性质进行了了研究.酶的最适pH为7.0,最适温度40℃;在偏碱性环境下酶活力较为稳定;在35℃以下酶活力较为稳定.Zn<2+>、Cu<2+>和Ag<+>对半酰胺酶表现出明显的抑制作用;Co<2+>则表现出明显的促进作用,Co<2+>可能在半酰胺酶的催化过程中发挥作用.
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