前言 上皮型钙粘蛋白(Epithelial Cadherin，E-cad)是维持上皮细胞及上皮组织形态结构的完整性及极性的重要分子。实验证明，肿瘤细胞间的粘附下降是导致肿瘤发生、发展的重要原因之一，而E-cad表达下降又是导致细胞间粘附下降的重要原因之一，所以E-cad表达与肿瘤细胞分化、侵袭转移密切相关。本实验应用免疫组织化学的方法观察E-cad在大肠癌，大肠腺瘤及正常大肠粘膜组织中的表达及其对大肠癌分化，浸润转移等生物学行为的影响。探讨E-cad在大肠良恶性肿瘤中的表达特点及其与大肠癌临床病理因素的关系。 材料和方法 采用免疫组织化学的方法检测40例大肠癌、30例大肠腺瘤及20例正常大肠粘膜组织标本中E-cad的表达情况，PBS代替一抗作阴性对照，用正常大肠粘膜组织作阳性对照。其中大肠癌组按Ducks分期分为A、B、C、D四期。按组织分化程度分为高、中、低三组。按病理类型分为管状腺癌、乳头状腺癌、粘液腺癌及印戒细胞癌四组。连续切片，厚度为5μm。E-cad抗体及相关试剂购自北京中山生物技术有限公司。具体方法：①脱腊、水化组织切片。②3％过氧化氢孵育5min，以阻断内源性过氧化氢酶。③微波热抗原修复。④滴加E-cad抗体，对照组滴加PBS，37℃孵育60min，PBS冲洗，2min×3。⑤滴加二抗，37℃孵育10min，PBS冲洗2min×3。⑥应用DAB溶液显色。⑦蒸馏水冲洗、复染、脱水、封片。显微镜下观察E－Cad在组织切片中的表达。结果判定标准：肿瘤细胞染色与正常粘膜细胞相同者为阳性（十人称之为保留表达，全部肿瘤细胞染色普遍降低，灶性降低者为异质性（。＊肿瘤细胞染色完全消失者为阴性（一人异质性和阴性为表达降低。统计学分析：数据处理采用 X‘检验，以 P＜0．05为有显著差异。 结 果 E－cad在正常大肠粘膜上皮组织均保留表达；在大肠腺癌组织中的保留表达率为 96．7％p9／30人在大肠癌标本中的保留表达率为52．5％p 人在大肠癌中，Ducks分期为AJ人对期的E－Cad保留表达率分别为80％K／5八75％（12／lh25％（2／8）和 27．3％瞻八人在组织分化程度赠中，高、中、低分化组的E一 cad保留表达率分另为 86．7畅（13／15）；45．5％（5／11）和 21．2％p八人在病理类型馆中，E－ad保留表达率为：管状腺癌70％门 h乳头状腺癌66．7％（4／6＊粘液腺癌25％闪／8厂印戒细胞癌16．7％O／6人 讨 论 大肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，肿瘤的浸润和转移严重威胁着人类生命，它是肿瘤患者死亡的主要原因。恶性肿瘤侵袭转移是一个十分复杂的生物学现象，它包括肿瘤细胞粘附于基质一一蛋白水解酶观基质一一肿瘤细胞移行等过程。细胞粘附是其中一个重要环节。E－C叨在肿瘤侵袭转移中的作用令人瞩目，是目前研究的一个热点。 E—Cad主要存在于人和动物的上皮细胞，是维护上皮细胞形态和结构的完整性和极性的重要分子，体外细胞培养实验已充分 ·2· 证明E－Cad可抑制肿瘤细胞侵袭和转移的能力。大量临床研究 资料也证明多种肿瘤E—cad表达减弱，且与肿瘤的转移性显著相 关。 本研究发现，E－Cad在大肠癌中表达降低率为47．5％，其与 肠癌临床DUCks棚、肿瘤的分化程度及组织学类型等均有关， 即分期越晚、分化越低的患者其E—Cad表达降低率愈高。产生这 种差异的原因可能是由于随着细胞癌变程度的加剧，肿瘤部位的 蛋白酶活性升高，将肿瘤细胞表面的E—Cad po而释放到外周血 中。已证实癌变励血清中E－ad含量升高，检测到的片段相当 于E－Cad蛋白的膜外肽段80，p部分。 E—Cad不仅是一种肿瘤细胞联转移抑制剂，也是一种主要 的正常细胞生长接触抑制剂，E－。ad在多数恶性肿瘤组织表达降 低，甚至消失，但在正常组织及良性病变中表达很高。肠癌与大 肠腺瘤E－Cad表达有显著性差异，这有助于良恶性肿瘤的鉴别。 有人用单克隆抗体离体阻断E—Cad受体，能增强瘤细胞的侵 袭和转移，另有人用表达E—Cad的CDNA转染瘤细胞能抑制瘤转 移，这表明E－Cad是浸润抑制因子，并有可能成为肿瘤治疗的新 靶点。 结 论 E－C叨在大肠良恶性肿瘤中的表达有显著性差异口＜0． 01人有助于良恶性肿瘤的鉴别。E－Cad的表达与大肠癌的临床 Ducks分期、组织学分化程度及病理类型有显著相关性门＜o． 05L大肠癌组织 E－Cad表达降低是其获得浸润转移能力的因素 之一。E－Cad可作为一种新的大肠癌标志物，其表达对判断预后 有一定价值。