丹参联合骨髓间充质干细胞静脉注射对急性心梗兔心肌修复影响的实验研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:epippo
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目的:探讨丹参注射液联合骨髓间充质干细胞静脉注射对兔急性心梗后梗死区心肌细胞的修复重建能力,及其对梗死区心肌缝隙连接分化的影响。材料与方法:于无菌条件下抽取兔胫骨骨髓,然后体外进行间充质干细胞分离、培养、扩增及Brdu的标记。采用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型,将造模成功的兔随机分为模型对照、静脉注射骨髓MSCs、静脉注射丹参及骨髓MSCs等3组,1周后,静脉注射骨髓MSCs组予干细胞混悬液(2×10~6细胞)一次性静脉注射;静脉注射丹参及骨髓MSCs组予干细胞混悬液(2×10~6细胞)一次性静脉注射,同时按15.4mg/kg予中药丹参注射液日一次静脉滴注,连续10天。5周后,取梗死的心肌组织,进行免疫组化Brdu染色以观察骨髓MSCs是否迁移至梗死区;取Brdu阳性的切片进行心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)免疫组化染色,观察迁移细胞是否分化以及分化的性质;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对Cx43进行定性和半定量分析,并于透射电镜下观察心肌超微结构,以判定心肌缝隙连接表达和分布的变化。结果:1.静脉注射丹参及骨髓MSCs组和静脉注射骨髓MSCs组,在梗死区域内均可见Brdu染色阳性的细胞,而模型对照组未见BrdU标记阳性细胞。2.静脉注射丹参及骨髓MSCs组和静脉注射骨髓MSCs组Brdu染色阳性的切片,cTnT免疫组化染色均为阳性。3.RT-PCR结果显示,各组在梗死区均有Cx43表达。而静脉注射丹参及骨髓MSCs组表达高于静脉注射骨髓MSCs组和模型组(P<0.05)。4.透射电镜下观察两组心肌的超微结构,结果静脉注射丹参及骨髓MSCs组与静脉注射骨髓MSCs组相比其肌丝排列及缝隙连接结构更接近正常心肌组织。结论:1.丹参注射液联合骨髓MSCs静脉移植修复兔急性心梗后心肌,可使骨髓MSCs成功迁移至梗死区,并分化为心肌样细胞。2.丹参注射液能够促进新生的心肌样细胞与周围组织建立缝隙连接,提高心肌Cx43的表达,使心肌超微结构和Cx43的表达与分布接近正常水平。从而为新生的心肌样细胞发挥正常心肌生理功能奠定了结构基础。
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