维生素C对团头鲂幼鱼生长及免疫的影响

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以团头鲂幼鱼为研究对象,以酪蛋白和明胶为蛋白源,豆油为脂肪源配制团头鲂幼鱼基础日粮,制成维生素C水平为0mg/kg(对照组)、30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg、240mg/kg和480mg/kg(试验组)(实测值分别为0.2mg/kg、33.4mg/kg、65.8mg/kg、133.7mg/kg、251.5mg/kg和501.5mg/kg)的6种等氮等能的试验日粮。每种日粮饲料随机投喂3组试验团头鲂幼鱼,每天投喂3次,达饱食水平,试验周期为90d。1.维生素C对团头鲂幼鱼生长、血液学及肌肉理化指标的影响随着日粮中维生素C(Vc)水平的增加,增重率(WG)、特定生长率(SGR)呈先上升而后趋于平缓的趋势,其中251.5mg/kg和501.5mg/kg Vc试验组团头鲂WG、SGR显著高于对照组(P<0.05)。各组间肝体比(HSI)和肥满度(CF)无显著性差异,仅133.7mg/kg Vc试验组团头鲂脏体比(VSI)显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,65.8mg/kg-501.5mg/kg Vc试验组显著降低了血液中白细胞(WBC)数量;65.8mg/kg Vc试验组显著降低了血清谷草转氨酶(AST)活力,133.7mg/kg和501.5mg/kg Vc试验组显著降低了谷丙转氨酶(ALT)的水平;501.5mg/kg Vc试验组显著提高了团头鲂血清中甘油三酯(TG)的水平;133.7mg/kg Vc试验组显著提高了肌肉中SOD活性(P<0.05)。日粮Vc水平对团头鲂幼鱼血液中红细胞(RBC)数量、肌肉蒸煮损失(CL)以及滴水损失(DL)等均无显著影响(P>0.05)。以鱼体WG为评价指标,经折线模型(Broken line model)回归分析,得到团头鲂幼鱼日粮中Vc的适宜水平为150mg/kg。2.维生素C对团头鲂幼鱼非特异性免疫以及肝脏三种HSPs mRNA表达的影响通过测定血清相关免疫指标、肝脏抗氧化指标、三种HSPs mRNA表达以及肝脏超微结构等指标,研究维生素(Vc)对团头鲂幼鱼免疫力的影响。试验结果表明,与对照组相比,501.5mg/kg Vc试验组能显著提高血清补体3(C3)的浓度,133.7mg/kgVc试验组能显著提高补体4(C4)的浓度;65.8、133.7和251.5mg/kgVc试验组能显著提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的活性,各Vc试验组均能显著提高肝脏抗超氧阴离子(ASAFR)的活性;133.7和251.7mg/kg Vc试验组能显著提高肝脏HSP60基因表达水平,251.5mg/kg Vc试验组能显著提高肝脏HSP70和HSP90基因表达水平(P<0.05)。日粮中Vc水平对团头鲂幼鱼血清碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、皮质醇以及肝脏丙二醛(MDA)的水平无显著影响(P>0.05)。综上所述,在本试验条件下,Vc作为免疫刺激剂,能有效地增强团头鲂幼鱼的免疫力。3.维生素C对团头鲂幼鱼抗pH应激的影响90d养殖试验结束后,各槽中选取20尾鱼进行连续15d的pH应激试验(pH≈9.5),分别于1d、5d、10d和15d采样,并分析团头鲂幼鱼血液生化指标、肝脏抗氧化指标以及肝脏三种HSPs mRNA的表达水平。结果表明,与应激前相比,团头鲂幼鱼在pH应激后血清补体3(C3)、补体4(C4)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)以及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和抗超氧阴离子(ASAFR)的水平显著降低;血清皮质醇、谷丙转氨酶(ALT)和肝脏丙二醛(MDA)的水平以及肝脏三种HSPs mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);其中皮质醇、SOD、ASAFR、MDA的水平以及肝脏三种HSPs mRNA的表达水平呈先升高后下降的变化趋势。pH应激下,与对照组相比,各维生素C(Vc)试验组不同程度的提高了团头鲂幼鱼血清C3、C4、ALP、TP、肝脏SOD和ASAFR的水平以及肝脏三种HSPs mRNA的表达水平;降低了血清皮质醇、ALT和肝脏MDA的水平(P<0.05)。综上所述,在pH应激下,日粮中添加维生素C,可提高团头鲂非特异性免疫力、抗氧化能力以及三种HSPs mRNA的表达水平,有效地增强团头鲂幼鱼抗pH应激的能力。4.pH应激下维生素C对团头鲂幼鱼抗嗜水气单胞菌感染的影响pH应激试验结束后,从每槽中各取6尾鱼(每组18尾)进行腹腔注射感染嗜水气单胞菌试验,分别于攻毒后12h、24h统计累计死亡率;并在攻毒后24h采集样本并检测团头鲂血液生化指标、肝脏抗氧化指标以及肝脏三种HSPs mRNA的表达水平。结果表明,与攻毒前相比,团头鲂幼鱼在攻毒后后红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和抗超氧阴离子(ASAFR)的水平显著降低;血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝脏丙二醛(MDA)的水平以及HSP60、HSP70mRNA的表达水平显著升高(P<0.05)。攻毒后,与维生素C(Vc)最低水平组(33.4mg/kg Vc试验组)相比,65.8和133.7mg/kg Vc试验组显著提高了血清总蛋白(TP)的水平;251.5mg/kg Vc试验组显著提高了肝脏HSP60和HSP70mRNA的表达水平,显著降低了血清谷丙转氨酶(ALT)和皮质醇的水平(P<0.05)。统计也表明,Vc试验组鱼的累计死亡率在攻毒后12h、24h均显著低于对照组(0.2mg/kg Vc组X P<0.05)。由此可见,在日粮中添加65.8-251.5mg/kg维生素C可增强鱼体抵抗病原菌感染的能力。
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