论文部分内容阅读
本研究从四川多个规模化猪场健康仔猪新鲜粪便中分离出15株芽孢杆菌,通过筛选得到3株分解蛋白质和淀粉能力较强的菌株,经细菌学鉴定,3株均为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。经耐酸性和耐胆盐抗逆性试验,产蛋白酶和淀粉酶试验,体外抑菌试验以及动物安全试验,最终筛选出一株能适应猪肠道环境、具有降解饲料中蛋白质和淀粉能力,对猪安全的菌株,编号为H6-3。经液体和固体发酵优化试验,确定了H6-3的最佳液体和固体发酵培养条件。液体最佳培养条件为:pH7.0,温度39℃,摇床速度150r/min。采用上述方法培养H6-3,当种子液浓度为107cfu/ml,接种量为1%（v/v）时,培养48h后,其活菌数达6.5×108cfu/ml。固体发酵最佳培养条件为:温度39℃,装料量40g/250ml,料水比1:1.1,当种子液浓度为107cfu/ml时,接种量为5%（v/w）,培养48h后,其固体培养物活菌数达1.33×1011cfu/g。经产蛋白酶定性试验,发现H6-3具有产蛋白酶的能力。在40℃,pH 6时,培养72h后,蛋白酶活力达到最高,其酶活力为753.187IU。临床应用研究结果表明,在猪饲料中添加H6-3,能显著地促进小猪的生长和增重,并且其增重效果高于与酵母菌（J44）和乳酸菌（19#）的组合。连续饲喂20d后,H6-3组、H6-3与J44组和H6-3与19#组的平均日增重分别为0.61 kg、0.56 kg、0.46 kg,而对照组的平均日增重为0.37 kg。通过方差分析,各试验组日增重较对照组差异显著（P＜0.05）,而H6-3组日增重较其它2组差异显著（P＜0.05）。采用H6-3的固体制剂和液体制剂分别饲喂仔猪,20d后发现,固体制剂组的效果优于液体制剂组,其小猪的平均日增重分别为0.25 kg、0.21kg,而对照组的平均日增重为0.16kg。通过方差分析,饲喂固体制剂组仔猪日增重显著高于饲喂液体制剂组和对照组（P＜0.05）。进一步研究发现,小猪饲喂H6-3固体制剂20d后,试验组小猪腹泻率仅为4.7%,成活率为100%;而对照组小猪的腹泻率为10.85%,成活率为89%。试验组较对照组平均日增重高11.44%,料肉比低8.91%。经T淋巴细胞增殖试验发现,饲喂H6-3 20d后,试验组小猪外周血液T淋巴细胞增殖率为47.7%,比对照组提高了8.4%。