【目的】肿瘤严重威胁人类的健康,而传统药物治疗毒副作用大,故寻找高效、低副作用的抗肿瘤药物成为当前的工作。美洲大蠊精制物CⅡ-3是由大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室研制的一种以肽类为主的物质,其抗肿瘤作用已经在多种人类肿瘤细胞上被证实,但抗肿瘤的机制尚未全面了解。本实验建立荷瘤小鼠模型,给予美洲大蠊精制物CⅡ-3和相关人工合成短肽HFDT1处理,研究其对荷瘤小鼠淋巴细胞的影响,探索其抗肿瘤的免疫机制,为该药的研发提供理论和数据支持。【方法】取6w龄、体重18-20g的SPF级BALB/c雌性小鼠,将MFC细胞悬液接种于小鼠右侧腋下,建立MFC荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分为模型组（生理盐水20mL/kg,ig,qd）、CTX组（45mg/kg,ip,q2d）、CⅡ-3高、低剂量组（400mg/kg and 200 mg/kg,20ml/kg,ig,qd）、短肽HFDT1组（7.8mg/kg,10ml/kg,ip,qd）,另设正常对照组（生理盐水20mL/kg,ig,qd）。小鼠肿瘤模型建立的次日,开始连续10d给药处理。其中,增殖试验在小鼠给药的第6天增加BrdU药物（4mg/mL,200μL/只,ip,bid）处理。从小鼠眼内眦静脉取血,荧光素抗体标记后FACS分析外周血淋巴细胞、B细胞、NK细胞和T细胞及其亚群的比例。无菌获取小鼠脾脏,研磨成单细胞悬液,荧光素抗体标记后FACS分析B细胞、NK细胞和T细胞及其亚群的增殖比例。取脾单细胞悬液,免疫磁珠分选纯化NK细胞和CTL细胞,将纯化的NK细胞和CTL细胞作为杀伤试验的效应细胞。取对数生长期MFC肿瘤细胞,CFSE染色标记后作为杀伤试验的靶细胞。将效应细胞和靶细胞按效靶比5:1和20:1加入无菌流式管,37℃5%CO₂培养箱培养4h后加入PI,FACS分析CFSE⁺PI⁺细胞。【结果】1.与正常组和CTX组比较,CⅡ-3高、低剂量组和HFDT1组外周血总淋巴细胞、B细胞和NK细胞比例增高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与正常组比较,模型组总淋巴细胞、B细胞和NK细胞比例也增高（P<0.05）;CTX组的总淋巴细胞、B细胞和NK细胞比例明显低于正常组和模型组（P<0.05）。2.与模型组和CTX组比较,CⅡ-3高、低剂量组和HFDT1组外周血总T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞比例增高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与正常组比较,CⅡ-3高、低剂量组和HFDT1组外周血总T细胞和CD8⁺T细胞比例增高,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.与正常组和CTX组比较,CⅡ-3高剂量组和短肽HFDT1组B细胞、NK细胞和T细胞增殖能功能增强,CⅡ-3低剂量组NK细胞和总T细胞增殖功能也增强,差异具有统计学意义（P<0.05）;4.与正常组和CTX组比较,CⅡ-3低剂量组CD4⁺T细胞和C D8⁺T细胞增殖能功能增强,CⅡ-3高剂量组CD4⁺T细胞增殖功能也增强,差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,CⅡ-3低剂量组CD4⁺T细胞增殖能功能增强,差异具有统计学意义（P<0.05）。5.与正常组和模型组比较,在效靶比例为5:1和20:1时,CⅡ-3高、低剂量组和短肽HFDT1组CTL细胞对MFC肿瘤细胞杀伤功能增强,差异具有统计学意义（P<0.05）。6.与正常组和模型组比较,在效靶比例为5:1时,CⅡ-3高、低剂量组和短肽HFDT1组NK细胞对MFC肿瘤细胞杀伤功能增强,差异具有统计学意义（P<0.05）;与CTX组比较,在效靶比例为5:1时,CⅡ-3高剂量组和短肽HFDT1组NK细胞对MFC肿瘤细胞杀伤功能增强（P<0.05）;与模型组比较,在效靶比例为20:1时,CⅡ-3高、低剂量组和短肽HFDT1组NK细胞对MFC肿瘤细胞杀伤功能也增强（P<0.05）。【结论】1.CⅡ-3和短肽HFDT1能上调荷瘤小鼠外周血总淋巴细胞、B细胞和T细胞及其亚群的比例,维持NK细胞的比例。2.CⅡ-3和短肽HFDT1能促进荷瘤小鼠T细胞、B淋巴细胞和NK细胞的增殖功能。3.CⅡ-3和短肽HFDT1增强了CTL和NK细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。