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随着工业化社会的快速发展,成千上万天然或人工合成的化学物质不断地涌入人们的生活环境,造成了日益加剧的环境污染,地球生物界特别是人类的生存和发展正受到严重威胁。环境毒理工作面临着空前艰巨的使命,同时也展现着广阔的发展空间和前景。有机溶剂作为科学实验和化学化工及相关行业生产中常用的载体试剂,由于其挥发性及自身毒性,已广泛暴露于环境单元,成为主要的环境污染物之一。由于其优异的理化性质,离子液体作为有机溶剂的替代品已逐渐广泛使用。然而离子液体毕竟是一种化学合成品,其对生物体的潜在危害研究也势在必行。本文系统考察了有机溶剂、离子液体及其混合物对淡水型发光菌青海弧菌Q67(Hbrio-qinghaiensis sp.-Q67)发光强度的抑制毒性,探讨了化合物结构、性质和组成的毒性差异,所得结果为两类溶剂毒性的评价和使用的选择提供理论依据和数据支持。
首先,以Veritas微孔板光度计为发光强度测试手段,应用毒性试验的微板发光法,测定了乙腈、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、四氢呋喃、异丙醇、苯酚、二甲亚砜、乙酰丙酮、乙酸乙酯、正丁醇、甲醛、吡啶、乙酸甲酯、乙二醇、水合腈、N,N-二甲基甲酰胺、1-甲基-2-吡咯烷酮、N,N-二甲基乙酰胺等20种有机溶剂,C<,6>H<,11>BF<,4>N<,2>、C<,8>H<,15>CIN<,2>、C<,8>H<,15>BF<,4>N<,2>、C<,9>H<,14>BF<,4>N、C<,9>H<,17>BF<,4>N<,2>、C<,9>H<,17>BrN<,2>、C<,11>H<,13>BF<,4>N<,2>、C<,11>H<,13>CIN<,2>、C<,12>H<,23>BrN<,2>、C<,14>H<,27>BF<,4>N<,2>、C<,14>H<,27>CIN<,2>、C<,16>H<,31>ClN<,2>等12种离子液体对青海弧菌Q67的毒性。结果表明,乙腈、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、四氢呋喃和异丙醇7种有机溶剂具有非单调的J型剂量-效应关系,曲线都有效应浓度为零的零等价剂量(zero equivalent dose,ZED);余下13种有机溶剂和12种离子液体为典型的S型剂量.效应关系。
接着,分别采用Biphasic、Logit和Weibull非线性函数对曲线进行模拟,得到完整的剂量.效应曲线,并由此估算了各化合物对青海弧菌的毒效应浓度EC<,x>值。对比单个化合物模型估算的半数效应浓度负对数值(-logEC<,50>),可知12种离子液体对青海弧菌的毒性最大者为5.445,这与苯胺甚至有机磷杀虫剂对青海弧菌的毒性相当;20种有机溶剂对青海弧菌的毒性均小于离子液体的毒性。
接着,分别运用均匀实验设计法和等效应浓度比法,测定了C<,12>H<,23>BFN<,2>、C<,14>H<,27>BF<,4>N<,2>、C<,14>H<,27>ClN<,2>、C<,16>H<,31>ClN<,2>等4种离子液体的混合物和C<,8>H<,15>ClN<,2>、C<,8>H<,15>BF<,4>N<,2>、C<,9>H<,14>BF<,4>N、C<,9>H<,17>BF<,4>N<,2>、C<,9>H<,17>BrN<,2>、C<,11>H<,13>ClN<,2>等6种离子液体的混合物对青海弧菌的联合毒性。对等效应浓度比法和均匀试验设计浓度比法配置的离子液体混合物,根据单一化合物剂量-效应曲线(dose-response curve,DRC),分别应用独立作用(independent action,IA)模型和剂量加和(dose addition,DA)模型对混合物DRC进行预测。结果表明,对前4种离子液体的各种混合物,DA模型都能准确预测其毒性,而IA模型高估混合物毒性。对后6种离子液体的各种混合物,除了EC<,10>浓度比混合物例外,DA模型能对其等效应浓度比混合物毒性做出有效预测,而IA模型低估混合物毒性;IA模型能对其均匀试验设计浓度比混合物毒性做出有效预测,而DA模型高估混合物毒性。在乙腈、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、四氢呋喃和异丙醇7种有机溶剂单一化合物对青海弧菌发光毒性试验的基础上,结合单个溶剂DRC曲线的三个特殊效应点,即ZED效应点、最大促进生长点EC<,min>和EC<,50>效应点,设计并测定了这几种有机溶剂的7个等效应浓度比混合物对青海弧菌的联合毒效应。结果表明,这7种混合物对青海弧菌的毒效应曲线仍为非单调的J型剂量-效应关系,且都存在效应浓度为零的零等价剂量。将甲醇、乙醇、乙腈3种有机溶剂ZED效应对应的溶液分别与C<,6>H<,14>BF<,4>N<,2>、C<,11>H<,13>BF<,4>N<,2>、C<,14>H<,27>ClN<,2>3种离子液体EC<,50>浓度对应的溶液组成混合物,检测各混合物对青海弧菌发光强度的影响,评价了有机溶剂与离子液体混合液对发光菌的联合毒性。