目的：分析上海仁济医院鲍曼不动杆菌的院内感染情况、耐药特征及流行趋势；检测β-内酰胺酶、主动外排泵基因在鲍曼不动杆菌中的分布；探讨外排泵在鲍曼不动杆菌耐药中的作用，为耐药机制的全面阐述、药物开发、临床治疗和控制院内感染提供依据。　　 方法：①收集2009年1月到10月上海仁济医院临床分离鲍曼不动杆菌共80株，其中亚胺培南耐药（IRAB）50株，敏感（ISAB）30 株。琼脂稀释法检测上述菌株对临床常用13 种抗生素的最低抑菌浓度（MIC），脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析主要流行型别。②三维试验检测AmpC 酶表型，EDTA 纸片协同试验检测金属酶表型；PCR 方法检测β-内酰胺酶基因（oxa-23、oxa-24、oxa -51、oxa -58、imp、vim、ampC）携带情况。③外排泵抑制试验（PAβN）检测外排泵表型，PCR 方法检测主动外排蛋白编码基因（adeB、adeJ、adeE、abeM）及AdeABC 调控基因（adeR、adeS）携带情况；实时荧光定量PCR 检测外排泵基因的表达量，并比较亚胺培南耐药株与敏感株基因表达的差异；通过DNA 重组将耐药株中的外排泵基因转入敏感菌中观察对亚胺培南MIC 变化。　　 结果：⑴收集的50 株IRAB 对阿米卡星、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮、头孢西丁、复方磺胺甲噁唑等抗生素耐药率均较高（MIC50>128 mg/L），30 株ISAB 对头孢西丁耐药率最高，MIC50 为256 mg/L，所有菌株对多粘菌素B 均敏感。 PFGE 结果显示80 株细菌可分为7 型，其中A 型67 株（83.8％），为主要克隆株。⑵三维试验结果显示，42 株（84％）IRAB AmpC 酶表型阳性，30 株ISAB中有9 株（30％）阳性，所有检测细菌金属酶表型均阴性；PCR 扩增，IRAB 中分别有36 株（72％）oxa -23、45 株（90％）ampC 阳性，而ISAB 中oxa -23、ampC阳性的分别为4 株（13.3％）和20 株（66.7％），80 株细菌中oxa-51 均为阳性，oxa-24、oxa-58、imp、vim 均阴性。⑶外排泵表型检测发现，33 株IRAB（66％）为阳性，ISAB全为阴性；PCR 扩增，IRAB 中分别有47 株（94％）adeB，45 株（90％） adeJ 和40 株（80％） abeM 基因阳性，在ISAB 中分别有13 株（43.3％） adeB，18 株（60％）adeJ 和15 株（50％） abeM 阳性。47 株adeB 阳性的IRAB 中，43 株（86％） 同时检测到adeRS，另有6 株 （12％） adeB 阳性的菌株同时检测到adeE 基因。实时荧光定量PCR显示IRAB 中adeB、adeJ、abeM 基因相对表达量平均值分别是ISAB的4、3、11 倍。统计学分析显示，二者存在明显统计学差异（P<0.01）。通过DNA重组，将adeABC-RS 基因导入ISAB 中，重组子对亚胺培南MIC 有了64-256 倍增加。　　 结论：上海仁济医院鲍曼不动杆菌耐药性较严峻，且存在播散流行。Oxa-23是造成鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要β-内酰胺酶；adeB、adeJ、abeM 广泛存在于亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中，其中AdeABC-RS 在引起亚胺培南耐药中发挥重要作用。