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目的 本课题旨在研究iRoot BP Plus对人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)增殖和成骨分化的影响及机制,以期为新型的生物活性材料iRoot BP Plus应用于活髓保存治疗提供基础研究依据。方法 1采用组织块加酶消化法分离培养人牙髓干细胞,流式细胞仪检测进行细胞鉴定。2制备浓度为5.56 mg/ml、11.11 mg/ml、33.33 mg/ml的iRoot BP Plus和三氧化矿物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)浸提液。各浓度浸提液处理人牙髓干细胞48 h,通过CCK-8法检测人牙髓干细胞的增殖活性。3选取最佳浓度(33.33 mg/ml)的iRoot BP Plus和MTA分别作用人牙髓干细胞14 d,应用茜素红染色法观察iRoot BP Plus、MTA和对照组人牙髓干细胞矿化结节形成的情况。4采用qRT-PCR法检测各组人牙髓干细胞中成骨相关基因OC、BSP、COL-I的mRNA表达水平。5采用Western Blot检测各组人牙髓干细胞中MAPK信号通路蛋白ERK、JNK及其磷酸化蛋白p-ERK、p-JNK的表达。结果 1成功培养出人牙髓干细胞,显微镜下观察符合牙髓干细胞的形态,流式细胞仪检测结果显示CD44、STRO-1表达呈阳性,CD34表达呈阴性,符合人牙髓干细胞的特征。2 iRoot BP Plus和MTA各浓度均可显著提高人牙髓干细胞的增殖活性(P<0.01),iRoot BP Plus对人牙髓干细胞增殖能力的影响高于相同浓度的MTA(P<0.05)。3 iRoot BP Plus组形成的矿化结节比MTA组的数量多、密度大;iRoot BP Plus组的IOD值显著高于MTA组(P<0.01)。4 iRoot BP Plus组和MTA组人牙髓干细胞中成骨基因OC、BSP、COL-I的mRNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.01),iRoot BP Plus组COL-I的mRNA相对表达水平显著高于MTA组(P<0.01),而MTA组BSP的mRNA相对表达水平显著高于iRoot BP Plus组(P<0.01)。5 iRoot BP Plus组和MTA组人牙髓干细胞中p-ERK和p-JNK的蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01),iRoot BP Plus组p-ERK的蛋白相对表达水平高于MTA组(P<0.05)。结论 1 iRoot BP Plus促进人牙髓干细胞增殖的作用优于相同浓度的MTA。2 iRoot BP Plus促进人牙髓干细胞的矿化能力的作用优于相同浓度的MTA。3 iRoot BP Plus可能是通过激活MAPK信号通路而上调下游成骨基因OC、BSP、COL-I的表达,进而促进人牙髓干细胞成骨分化。iRoot BP Plus对MAPK信号通路及下游基因的调控能力可能优于MTA。