【摘 要】
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TGF-β作为造血干/祖细胞自分泌的一种双向造血调控因子,可下调Flt-3L、SCF、IL-3等生长因子受体的表达,并使造血干细胞停留在G期,影响体外扩增的效率.因此推测在造血干细胞
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TGF-β作为造血干/祖细胞自分泌的一种双向造血调控因子,可下调Flt-3L、SCF、IL-3等生长因子受体的表达,并使造血干细胞停留在G<,0>期,影响体外扩增的效率.因此推测在造血干细胞体外扩增过程中加入TGF-β抗体,可以促使造血干细胞进入细胞增殖周期,从而增加干/祖细胞的扩增效率,同时并不影响造血干/祖细胞归巢的能力.该研究从此角度出发,从6份新鲜脐血标本中经密度梯度离心和miniMACS免疫磁珠分选纯化CD34<+>细胞,在37℃、5％CO<,2>饱和湿度下,将其接种于含SCF+Flt-3L+TPO+IL-3因子组合的SFEM无血清培养体系中,分组如下:(1)空白组:即上述培养体系;(2)对照组:在上述培养体系中加入兔抗人IgG抗体;(3)实验组:在上述培养体系中加入TGF-β1抗体.培养6天后,计数3组有核细胞数,并用FACS检测CD<34>、c-kit(CD117)、CD11a、CD49d、CD33表达情况,同时将3组细胞种于甲基纤维素培养基,37℃、饱和湿度、5％CO<,2>条件下培养14天,计数CFU-GEMM、BFU-E、CFU-GM集落形成数.该研究表明,TGF-β抗体可协同早期干细胞生长因子有效扩增脐血有核细胞、CD34<+>细胞、早期祖细胞亚群CD34<+>c-kit<+>细胞、含有更早期祖细胞的亚群CD34<+>c-kit<->细胞及相对早期祖细胞集落CFU-GEMM、BFU-E.同时并不降低造血干细胞归巢相关粘附分子的表达.提示本方法有可能解决脐血造血干细胞数量不足的问题,从而扩大脐血移植的范围,缩短移植后造血重建的时间.
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