【摘 要】
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目的:制备MRK-16 修饰免疫脂质体,并检测免疫脂质体对非小细胞肺癌多药耐药细胞的杀伤及多药耐药逆转作用。方法:采用旋转蒸发法制备硫酸铵脂质体,阿霉素的包载,采用硫酸铵梯
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目的:制备MRK-16 修饰免疫脂质体,并检测免疫脂质体对非小细胞肺癌多药耐药细胞的杀伤及多药耐药逆转作用。方法:采用旋转蒸发法制备硫酸铵脂质体,阿霉素的包载,采用硫酸铵梯度载药。药物包载后以葡聚糖凝胶G-50 去除游离阿霉素,以紫外分光光度计测定脂质体的包封率;并检测回收率;冻干阿霉素脂质体成前体脂质体,紫外分光光度计测定脂质体的渗漏率。水化前体脂质体后短时超声,按一定的比例加入25%戊二醛,20 分钟后透析去除多余戊二醛,加MRK-16 单克隆抗体过夜,葡聚糖凝胶G-200 分离游离MRK-16单克隆抗体与免疫脂质体,按一定的比例稀释MRK-16 修饰免疫脂质体。体外培养SPC-A1/TAX 细胞,进行耐药指数测定。分组后进行体外细胞毒与多药耐药逆转试验;并对免疫脂质体作用于细胞的量效与时效进行研究。流式细胞仪在488nm 激发光下分别于2、4、6 小时检测SPC-A1/TAX 内细胞药物浓度。结果:采用旋转蒸发法制备出纳米级脂质体,梯度载药后测定所得脂质体平均ADM 包封率为98%。冷冻干燥法制备前体脂质体,水化后测定ADM包封率,包封率为90.5%。前体脂质体水化后偶连MRk-16 单克隆抗体,以SPC-A1/TAX 为靶细胞,制备的免疫脂质体对靶细胞具有特异性杀伤作用,免疫脂质体细胞杀伤率(48h)达67.7%;脂质体达50.3%;免疫脂质体多药耐药逆转指数达7.45;脂质体达4.28。流式细胞仪检测SPC-A1/TAX 内细胞药物浓度,在免疫脂质体、脂质体组SPC-A1/TAX 内细胞药物浓度明显高与ADM 组。结论:采用旋转蒸发法制备硫酸铵脂质体后梯度载药;所得脂质体具较高的包封率且稳定性好;冻干后所得前体脂质体,其渗漏率较低,前体脂
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