人类特有小RNA miR-941与其海绵长非编码RNA TP73-AS1的调控及功能初探

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miR-941是迄今唯一报道的人类特有的miRNA,它可能在人类进化中发挥贡献。TP73-AS1作为miR-941的天然海绵,是一个灵长类特有的长链非编码RNA。两者在正常细胞中的功能和它们之间的调控关系尚属未知。本论文中,通过基因过表达和基因沉默基因的手段对这些问题进行探索。首先,通过基因表达检测的内参基因筛选,鉴定并选用了snRNAs U49A和U48作为miR-941表达量检测的内参基因,β-actin和GAPDH作为长链非编码RNA和蛋白编码基因mRNA表达量的内参基因。其次,以人类神经胶质瘤细胞U251为细胞系统建立过表达和沉默的稳转细胞系和瞬转细胞系。第三,在建立的细胞系中对miR-941与TP73-AS1表达量进行检测,发现miR-941和sponge TP73-AS1具有一定的拮抗关系,但随着细胞代数其调控关系显示出时间效应,显示miR-941和sponge TP73-AS1的相互调节在细胞中是一个动态的过程。第四,miR-941沉默导致U251细胞形态发生显著变化,并且导致细胞死亡。免疫荧光染色显示这些细胞内微丝分布模式发生改变;调控微丝动态性的重要基因FLNA等受到miR-941表达量的影响。论文的研究结果显示miR-941在人类进化枝中的产生可能对细胞生存具有重要功能,它在细胞内通过影响细胞骨架对细胞表型和活动进行调控。
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