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目的:建立检测内氏放线菌与龋齿放线菌的实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法,探讨内氏放线菌和龋齿放线菌在唾液中的定植数量与乳牙龋失补牙面指数(dmfs)的关系。 方法:分别采集59名不同患龋状况儿童唾液样本,其中无龋组(dmfs=0)19名、中龋组(dmfs=4~6)21名和高龋组(dmfs>8)19名。提取细菌总基因组DNA,应用SYBR GreenⅡ模式的实时荧光定量PCR技术,对唾液中的内氏放线菌及龋齿放线菌进行定量检测,所得数据应用SAS9.2统计软件进行统计学分析。 结果:内氏放线菌占总菌的比例在三组中有显著差异(P<0.05),在高龋组中显著高于中龋组(P<0.0001),在中龋组与无龋组间无显著差异(P>0.05);龋齿放线菌占总菌的比例在三组中无显著差异(P>0.05)。 结论:儿童唾液中内氏放线菌的数量与龋病的发生发展过程有明显相关性;龋齿放线菌与儿童龋病的发生发展无明显相关性。作为一种定量检测细菌的方法,实时荧光定量PCR技术可应用于致龋菌的检测分析。