中药头花蓼治疗犬猫淋证的药效及疗效观察

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头花蓼是一种常用的中草药,分布于我国南方地区,具有清热解毒、利尿通淋的作用。临床上常用于治疗人的泌尿系统疾病,如:血尿、肾盂肾炎、膀胱炎、结石、尿道感染等。随着宠物数量及寿命的增长,犬猫泌尿系统的炎症性疾病也随之增加,临床上常用的治疗药物主要是抗生素类,但此类药物长期反复使用,会导致细菌产生耐药性,使治疗效果下降,另外,有相当一部分病例并不存在细菌感染,而属于无菌性炎症,抗生素无治疗效果。相对于抗生素,中药头花蓼经过多年的临床及试验证实,在治疗人泌尿系统炎症上有较好效果,且毒副作用小。因此,研究头花蓼的抗炎作用对治疗犬猫的泌尿系统炎症有重要意义。本研究首先对头花蓼的水煎法提取工艺进行优化,然后通过建立体内外炎症模型研究头花蓼的抗炎活性,最后将其制备成片剂用于辅助治疗多例犬和猫的下泌尿系统炎症疾病,为头花蓼及其制剂的临床应用提供一定依据。本研究主要包括以下五部分:试验Ⅰ.头花蓼提取工艺的研究 本试验旨在研究头花蓼干浸膏的最佳水煎提取工艺,为后续试验提供试验药物。采用单因素试验设计方法,以干浸膏得率作为考察指标,对头花蓼水煎提取的煮沸时间、料液比、提取次数进行单因素考察,缩小因素考察范围,再用正交试验L9(33)法,优选最佳头花蓼干浸膏提取工艺条件。结果表明三个因素对头花蓼干浸膏产率影响的次序为煮沸时间>提取次数>料液比。最佳制备工艺条件为料液比1:20,重复煎煮提取3次,每次煮沸90min,在此条件下,水煎提取头花蓼干浸膏的提取率为14.9%。试验Ⅱ.头花蓼的体外抗炎作用的研究 本试验旨在研究头花蓼水提液的体外抗炎效果。首先通过给小鼠连续3天腹腔注射肉汤培养基,刺激巨噬细胞于腹腔内积聚,处死小鼠并用PBS灌洗腹腔,采集小鼠腹腔巨噬细胞后贴壁培养。用MTT法检测头花蓼对巨噬细胞的最大安全浓度,再利用LPS刺激细胞构建巨噬细胞炎症模型。将浓度分别为10、100、500μg.mL-1的头花蓼水提液对巨噬细胞预处理,再培养24h,加5 μg·mL-1 LPS刺激巨噬细胞。结果表明浓度为100 μg·mL-1及以上浓度的头花蓼水提液能显著降低LPS刺激巨噬细胞所产生的TNF-α、IL-6和NO的浓度,表明头花蓼水提液体外具有良好的抗炎活性。试验Ⅲ.头花蓼的体内抗炎作用的研究 本试验旨在研究头花蓼水提液的体内抗炎效果。首先测定了头花蓼对小鼠的急性毒性,再用二甲苯刺激小鼠耳廓建立小鼠耳肿胀炎症模型,通过灌胃先给小鼠用药一周,研究灌胃药物对小鼠耳肿胀炎症以及头花蓼对LPS诱导的小鼠全身性炎症的影响。试验结果表明,ICR小鼠对头花蓼最大耐受量>80g·kg-1.bw。灌胃10、20 g·kg-1的头花蓼组能显著降低二甲苯引起的耳肿胀率升高(P<0.05),且对小鼠耳组织的局部炎性损伤具有一定的保护作用,当灌胃剂量≥5 g·kg-1时,头花蓼能显著抑制LPS引起的小鼠血清中IL-6、TNF-α和IL-1β浓度的上升(P<0.05),表明头花蓼经口给药时具有较好的抗炎效果。试验Ⅳ.头花蓼片剂的制备 本试验旨在研究头花蓼片剂的制备工艺。首先根据片剂制备的一般方法原则,采用湿法制粒压制片剂,拟定初步处方,在此基础上,以软材性状、过筛难易、适口性、硬度、崩解时限及片剂外观等作为评价指标,改进了初步处方中的润湿剂、矫味剂、润滑剂和崩解剂的用法用量,并最终确定处方为头花蓼干浸骨10g,预胶化淀粉2g,微晶纤维素1.2g,牛肉精粉0.1 g,羧甲基淀粉钠(内加)1.2 g,润湿剂40%乙醇,硬脂酸镁0.05 g,羧甲基淀粉钠(外加)0.8 g。验证试验表明,该处方工艺下制备的头花蓼片剂各项性状指标均符合中药浸膏片的质量要求,表明该处方工艺合理,质量稳定可靠。试验Ⅴ.头花蓼片辅助治疗犬猫下泌尿道疾病效果观察 本试验旨在研究头花蓼片在宠物临床上治疗下泌尿道疾病的效果。首先采用临床检查、实验室检查、影像学检查等方法对临床上的犬猫病例进行诊断,筛选患有下泌尿道疾病且采用保守治疗的犬或猫,在一般治疗的基础上使用头花蓼片进行治疗,结果显示,使用头花蓼片辅助治疗的6例膀胱炎病例和2例尿路感染病例均治愈,,4例膀胱结石病例的治愈3例。临床试验表明,头花蓼对犬猫淋证有较好的治疗效果。
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