【摘 要】
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目的通过检测糖尿病视网膜病变患者血清转运RNA片段及转运RNA半体的表达情况,以及糖尿病性白内障患者房水代谢组学的研究,探索二者在糖尿病眼部病变发生发展中的作用机制及潜在治疗靶点。方法(1)提取正常对照组和糖尿病无视网膜病变患者血清RNA,预处理后上样t RF&ti RNA PCR Array,检测转运RNA片段(t RNAderived RNA Fragments,t RFs)以及转运RNA半体
【基金项目】
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国家重点研发计划(项目号:2016YFC0904800);
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目的通过检测糖尿病视网膜病变患者血清转运RNA片段及转运RNA半体的表达情况,以及糖尿病性白内障患者房水代谢组学的研究,探索二者在糖尿病眼部病变发生发展中的作用机制及潜在治疗靶点。方法(1)提取正常对照组和糖尿病无视网膜病变患者血清RNA,预处理后上样t RF&ti RNA PCR Array,检测转运RNA片段(t RNAderived RNA Fragments,t RFs)以及转运RNA半体(t RNA halves,ti RNA)在正常对照组及糖尿病无视网膜病变患者血清中的表达谱,进一步扩大样本行q PCR验证,初步发掘疾病相关的血清标记物。(2)提取糖尿病视网膜病变组和无视网膜病变组患者血清RNA,预处理后上样t RF&ti RNA PCR Array,检测t RFs和ti RNAs在这两组患者血清中的表达谱,进一步扩大样本行q PCR验证筛选目的基因。合成目的基因抑制剂观察高糖培养下对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)及人视网膜微血管内皮细胞(h RMEC)增殖能力的影响。(3)采集糖尿病性白内障患者与年龄相关性白内障患者房水,通过代谢组学研究两组代谢物的差异,探索潜在参与的信号通路及机制。结果(1)与正常对照组相比,糖尿病无视网膜病变患者血清中t RFs和ti RNAs表达谱变化,多种t RFs和ti RNAs表达下降,经扩大样本q PCR验证得出,其中3’ti R_080_Pro TGG,TRF327及3030A下降,差异均有统计学意义。(2)与糖尿病非视网膜病变组相比,糖尿视网膜病患者血清中t RF&ti RNA表达谱变化,多种t RFs和ti RNAs表达升高,经扩大样本q PCR验证发现TRF327和3030A表达升高,差异有统计学意义。高糖环境下3030A可影响ARPE-19细胞增殖能力,而对h RMEC细胞增殖能力的改变无统计学意义。(3)糖尿病性白内障患者房水与年龄相关性白内障患者房水中代谢物比较,葡萄糖升高,缬氨酸、赖氨酸、酪氨酸表达下降。氨酰基t RNA合成通路等参与调控糖尿病性白内障发生及进展。结论(1)t RFs和ti RNAs在糖尿病及糖尿病性视网膜病变患者血清中表达谱改变,可通过影响视网膜外屏障功能调控糖尿病视网膜病变的发生及进展,为发掘血清标记物及治疗靶点提供依据。(2)氨基酸代谢通路在糖尿病性白内障发生发展中发挥重要调控作用,这一结果为探索糖尿病性白内障机制以及新的干预靶点提供了新的思路。
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