液基细胞学标本中p16INK4a、Ki67的表达及导流杂交HPV分型在子宫颈癌及癌前病变中的意义

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目的:探讨LCT细胞学标本中p16INK4a、Ki67的免疫细胞化学染色及导流杂交HPV基因分型在筛查子宫颈鳞状细胞癌和子宫颈癌前病变的价值。方法:应用免疫细胞化学和免疫组织化学方法对194例细胞学标本和91例组织活检标本进行p16INK4a、Ki67检测;应用导流杂交的方法检测48例细胞学标本的HPV基因型并与组织学诊断结果做对比。对所得结果应用SPSS10.0分析软件进行卡方检验、Spearman等级相关检验、单因素方差分析和Kendall’s tau-b等级相关检验。结果:①p16INK4a在NILM、ASC-US、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC各组中的阳性率分别为4.17%(1/24)、35.14%(26/74)、85.71%(6/7)、80%(36/45)、100%(41/41)、100%(3/3)。炎症、ASC(ASC-US+ASC-H)、LSIL、HSIL(HSIL+SCC),各组间阳性表达率经两两比较差异有统计学意义,P值均小于0.0083。ASC-H阳性表达率明显高于ASC-US组,经卡方检验,差异有统计学意义(X2=87.58,P=0.0000)。经Spearman等级相关分析,p16INK4a的平均染色强度与病变级别正相关(r=0.722,p<0.01)。p16INK4a免疫细胞化学染色检出高级别病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、65.63%、83.58%、100%。②Ki67在HSIL、SCC和ASC-H组的LI值较高,NILM、ASC(ASC-US+ASC-H)、LSIL、HSIL(HSIL+SCC)组经方差分析各组间差异均有统计学意义(p<0.05)。经Kendall’s tau-b等级相关分析,Ki67的表达与级别呈正相关(r=0.577,P<0.001);Ki67和p16INK4a具有正相关性(r=0.716,P<0.01)。Ki67免疫细胞化学染色筛检子宫颈高度病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为92.86%、75.00%、86.67%、85.71%。③91例细胞学标本中LSIL及以上病变p16INK4a和Ki67与组织学诊断符合率分别为87.30%(55/63)和80.95%(51/63)。④48例液基细胞学剩余标本,HPV总感染率为70.83%(34/48),高危型HPV感染率54.17%(26/48);单一型感染率29.17%(14/48);二重感染率:18.75%(9/48);三重感染率:18.75%(9/48);四重感染率:2.10%(1/48);五重感染率:2.10%(1/48)。21种亚型感染率依次为:16(31.25%)、6(20.83%)、58(18.75%)、33(14.58%)、18(12.5%)、53(12.5%)、52(8.33%)、CP8304(6.25%)、68(4.17%)、31(2.08%)、66(2.08%)、11(2.08%)、39(2.08%)、43(2.08%)、59(2.08%)、45、56、44、51、42与35型在本组研究中未检测到阳性。不同病变高危型HPV感染率分别为:NILM:33.33%(6/18);ASC:53.85%(7/13);LSIL:60%(6/10);HSIL:100%(7/7),差异有统计学意义(X2=9.7803,P=0.0205)。单一型和混合型HPV感染子宫颈上皮病变的发生率分别为35.29%(6/17)、94.12%(16/17),经确切概率法卡方检验P=0.0167。HR-HPV检测用于评价宫颈高度病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:100%、52.63%、55%、100%。结论:①HPV的感染、p16INK4a的表达上调、Ki67标记指数的增高与子宫颈癌及其癌前病变密切相关。②高危性HPV感染是导致子宫颈癌及癌前病变中p16INK4a的表达上调的原因之一。③HPV的分型检测对于宫颈癌及癌前病变的诊断、治疗、随访及疗效观察有重要意义。④p16INK4a的高表达、Ki67标记指数与子宫颈病变级别呈正相关,作为客观的生物学标记物,可为临床医师评价病情,估计病变的进展,预测患者的愈后提供有价值的辅助指标。⑤p16INK4a/Ki67的检测和HPV的基因分型对于评价子宫颈高度病变,减少漏诊率,提高子宫颈癌的早期诊断有重要意义。⑥p16INK4a/Ki67的检测和HPV的基因分型可用于细胞学ASC-US病人的筛检分流。⑦利用液基细胞学剩余标本同时进行免疫细胞化学染色和HPV基因型的分型可减少病人重复取材的痛苦,减轻了病人的经济负担,并且及时的为临床医师处理病情提供可靠的辅助指标。⑧导流杂交是一种融导流杂交与基因芯片于一体的快速杂交平台,具有高敏高效性。
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