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microRNAs(miRNAs)是一类长度大约是2.nt的小分子RNA,能通过与靶mRNA互补影响其稳定性,从而抑制靶mRNA的翻译,在脊椎动物基因表达的调控中起重要作用。在农业生产中,为提高农药药效、减少农药用量,经常使用复配农药;与此同时,农药对环境中生物的潜在影响也不容忽视。研究miRNAs在毒性基因组学中的作用非常重要:miRNAs可以用作毒物的生物标志物,为合理评价农药的危害提供依据。
在中国长江中下游和东南沿海地区广泛使用的三唑磷、氟虫腈,是比较有代表性的有机磷杀虫剂和苯基吡唑类杀虫剂,本研究以三唑磷、氟虫腈为供试药剂,分别研究它们及其复合物对斑马鱼的毒性作用。研究表明:三唑磷对斑马鱼的96小时LC50为5.2.mg/l,属于中毒;氟虫腈对斑马鱼的96小时LC50为0.18.mg/l,属于是高毒。用T1模型来评价三唑磷和氟虫腈复配后的联合毒性,结果表明三唑磷和氟虫腈复合后的联合毒性是相加作用。
本研究用miRNA芯片研究三唑磷微乳剂、氟虫腈微乳剂以及其混合物对斑马鱼的miRNAs表达的影响,结果显示219条待测miRNA中有21条miRNA的表达发生了改变。三唑磷造成斑马鱼中miR-30b、miR-135c、miR-365、miR-21、miR-31、miR-203b和miR-455的表达发生改变,其微乳剂造成斑马鱼中miR-203、miR-155、miR-99的表达发生改变:两者引起斑马鱼中表达发生变化的miRNA不相同。氟虫腈造成斑马鱼中miR-199*、miR-22b和miR-499的表达发生改变,其微乳剂却造成let-7i、miR.155的表达发生改变:两者引起斑马鱼中表达发生变化的miRNA也不相同。氟虫腈和三唑磷混合物造成斑马鱼中miR-203b*、miR-735、miR-9*和miR-128的表达发生改变,氟虫腈和三唑磷微乳剂混合物造成miR-181a的表达发生改变,助剂造成斑马鱼中miR-29b、miR-738的表达发生改变。在上述原药和微乳剂中没有相同的miRNA表达发生改变。综上所述:三唑磷和氟虫腈的原药和微乳剂对斑马鱼中的miRNA表达的影响是完全不相同的,农药复配后,对斑马鱼中miRNA表达的影响与单一农药也是完全不同的,这说明三唑磷和氟虫腈在其加入助剂、复合后的毒性已经发生改变。
上述miRNAs中的let-7i、miR-21、miR-30b、miR-31、miR-128、miR-155和miR-181a的功能机制已有报道,它们在肿瘤的形成和免疫系统中起到作用。综上所述,结果表明miRNAs呈现出一种新的毒物响应方式可以用作毒物生物标记物,为将来研究涉及到与农药相关疾病提供了一个不同的研究方向。