【摘 要】
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本论文目的是利用脂肪酶催化不对称转酯化反应拆分外消旋帕罗西汀中间体,从而获得光学纯帕罗西汀中间体。论文建立了帕罗西汀中间体液相色谱分析方法,得到液相色谱检测的工作
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本论文目的是利用脂肪酶催化不对称转酯化反应拆分外消旋帕罗西汀中间体,从而获得光学纯帕罗西汀中间体。论文建立了帕罗西汀中间体液相色谱分析方法,得到液相色谱检测的工作曲线Y=52894.7X-26242.1,相关系数R2=0.9998。实验建立了手性正相液相色谱分析方法,用于检测帕罗西汀中间体的对映体过量值。本论文利用荧光检测技术以帕罗西汀中间体为底物,乙烯乙酸酯为酰基供体,建立脂肪酶酯化活性的高通量筛选模型。实验以485nm为荧光激发波长,538nm为荧光吸收波长,建立了脂肪酶筛选模型的工作曲线Y=10685X+176.15,相关系数R2=0.9972。结合手性正相液相色谱仪法分析酶催化反应的底物对映体过量值,得出Novozym435对帕罗西汀中间体具有较高的酯化活性和立体选择性。本论文对Novozym435在有机相中催化拆分外消旋帕罗西汀中间体反应的影响因素进行了研究。研究表明其最佳转化条件为：反应溶剂二氯甲烷,酰化剂乙烯乙酸酯,反应温度30℃,底物浓度200mM,摇床转速200r/min,底物与酰化剂的摩尔比例为1：1,反应时间12h。在该酶催化反应条件下,反应转化率为54.0%,底物对映体过量值为96.3%,E值为40.0。Novozym435重复使用8批次,酶活性和立体选择性保持基本稳定。本论文的酶催化反应研究为将来酶法合成手性帕罗西汀的工业化应用打下了基础。
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