土壤中乙草胺降解菌的筛选与主要影响因子研究

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乙草胺(Acetochlor)广泛用于北方玉米、大豆、花生、棉花、马铃薯等作物的杂草防除。该除草剂是我国使用最多的3种除草剂之一。虽然为农业生产提供了不少帮助,但是其负作用也是不可忽视的。它除了具有直接毒性外,还有不易挥发、不易光解、易残留的特点,其原药为非极性油状分子,水溶性极小,对生态环境和人类存在着巨大的潜在威胁。本试验通过在土壤中富集培养、分离出对乙草胺具有一定降解作用的微生物,并对其降解效果逐一进行测定,将效果最佳的送交权威机构进行分子生物学鉴定,并对主要影响因子进行了初步研究,为今后利用微生物治理乙草胺残留的相关研究提供一定参考。主要结论如下:1降解菌的驯化培养与分离选取山东威海,江苏泰州以及重庆三地大田土壤和乙草胺生产厂家排污池内淤泥,以乙草胺原药制作无机盐培养基,作为土壤中细菌和真菌的唯一C源和唯一N源,通过富集培养,反复多次分离纯化,得到14株对乙草胺具有降解效果的微生物。其中重庆土壤分离到5株降解菌,C源菌3株,N源菌2株;山东土壤分离到5株,C源菌2株,N源菌3株;江苏土壤中分离到降解菌4株,C源菌和N源菌各2株,农药厂排污池中采集的土壤未能分离到降解菌。2降解效果测定采用气相色谱法对14株降解菌的降解效果分别进行测定,其降解率分别为:渝C1:20.06%、渝C2:0.39%、渝C3:1.07%、渝N1:10.48%、渝N2:12.83%、鲁C1:16.33%、鲁C2:29.20%、鲁N1:24.38%、鲁N2:9.84%、鲁N3:16.23%、苏C1:18.63%、苏C2:2.48%、苏N1:6.08%、苏N2:6.51%。其中,鲁C2为最佳降解菌。3高效降解菌的鉴定将鲁C2号菌株送交中国工业微生物菌种保藏管理中心西南菌种站,进行分子生物学鉴定,确定该菌为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)。4影响降解效果的主要因子研究确定降解时间、接菌量、土壤含水量、温度和乙草胺添加量为主要影响因子,研究结果表明:时间对降解效果的影响:在前15d内,降解效果与时间基本成正相关关系,15d之后则降解率在大体上保持恒定,不再升高。接菌量对降解效果的影响:随着接菌量的增加,降解率也逐渐升高,两者的相关性非常高。土壤含水量对降解效果的影响:在土壤含水量到达100%之前,降解效果与土壤含水量基本成正相关关系,超过100%之后则降解率在大体上趋于稳定,升高缓慢。温度对降解效果的影响:从总体上看,温度与降解效果基本上成抛物线关系。其中,最好的降解效果出现在温度为30℃时。乙草胺添加浓度对降解效果的影响:乙草胺添加浓度对降解效果有一定的影响,但总体来看并不大。
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