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本研究以橡胶树胶乳和烟草为研究材料,进行巴西橡胶树胶乳非细胞凋亡体系的研究。鉴定转HbMyb1基因烟草。通过形态学鉴定、PCR检测及Southern检测,证明实验所用的烟草为转HbMyb1基因烟草。建立烟草细胞悬浮培养体系,实验结果表明：以MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+琼脂7.5g/L诱导烟草愈伤效果最好；最佳继代培养基为MS+2,4-D 0.3mg/L+KT0.3mg／L+琼脂7.5g／L,继代四代之后可获得脆散性愈伤组织；将所得脆散性愈伤组织接种于MS+2,4-D 0.2mg,L+KT 0.2mg／L+0.1％水解酪蛋白液体培养基中,可获得生长迅速、颜色淡黄、分散性和均一性均较好的烟草细胞悬浮系；第7天为烟草悬浮培养细胞的最佳继代时间。采用不同方法采集胶乳,提取胶乳DNA,结果显示不同采集方法对胶乳DNA的完整性没有明显影响。胶乳经超速离心后分为三层(上层主要是橡胶粒子,中间层是胶乳的可溶性胞质成分,下层主要是黄色体),分别对这三层提取DNA,发现DNA几乎全部集中于黄色体层中。证明胶乳的可溶性胞质中几乎不含有DNA,不会干扰到后续的实验。在胶乳非细胞体系加入细胞色素c,至终浓度为2.5μmol/L,可将该非细胞体系转化为凋亡诱导体系。在该体系中加入烟草细胞核,23℃温浴,可诱导烟草细胞核发生细胞凋亡,TUNEL检测呈阳性,琼脂糖凝胶电泳产生典型的DNA Ladder.在诱导烟草细胞核发生细胞凋亡的过程中,发现转HbMyb1基因烟草细胞核发生凋亡的时间晚于野生型烟草细胞核。对健康树和死皮树胶乳非细胞体系进行In-gel nuclease assay分析的初步结果示,两者的核酸酶带型有差异。死皮树胶乳核酸酶在33-48KD之间出现2条特异带。