论文部分内容阅读
目的:探讨铁皮石斛多糖(polysaccharides of dendrobium candidum, PDC)对体外高糖环境下培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)产生NO、TNF-α和ICAM-1的影响。方法:以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为对象,高糖(33.3mmol/L)孵育48h诱导损伤,用铁皮石斛多糖(100、200、400和800μg/mL)处理细胞48小时,采用MTT法检测各组细胞活力;将HUVECs随机分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖)、对照组+铁皮石斛多糖组(400μg/mL PDC)、高糖组(33.3mmol/L)、高糖+铁皮石斛多糖组(400μg/mL PDC),加入相应培养液培养不同时间(24h、48h and72h),采用Griess法检测NO的含量;采用Western blot法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞粘附分子1(ICAM-1)蛋白表达水平。结果:高糖(33.3mmol/L)环境下体外培养的人脐静脉内皮细胞生长明显受到抑制,NO生成减少,TNF-α和ICAM-1的表达增加,但铁皮石斛多糖(PDC)能有效拮抗上述变化,并具有统计学意义。①与对照组相比,铁皮石斛多糖(100、200、400和800μg/mL)不影响HUVECs的细胞活力(均P>0.05)。②与高糖组相比,高糖+铁皮石斛多糖(100、200、400和800μg/mL)HUVECs的细胞活力增加(均P<0.05),呈浓度依赖性,但PDC400μg/mL与800μg/mL相比,HUVECs的细胞活力无明显改变(P>0.05)。③高糖处理HUVECs24h时NO水平较正常组升高(P<0.05),于48h时较正常组降低(P<0.05),延长至72h时较48h NO含量无明显改变(P>0.05)。高糖+PDC400μg/mL组处理HUVECs24h时较高糖组NO水平降低(P<0.05),于48小时时较高糖组升高(P<0.05),延长至72h时较48h NO含量无明显改变(P>0.05)。与对照组相比,对照组+PDC组在各时间点NO水平差异无显著性(P>0.05)。④400μg/mL PDC处理高糖诱导HUVECs48h,高糖组较对照组相比,TNF-α含量显著增加(P<0.05),ICAM-1表达显著增加(P<0.05);高糖+400μg/mL PDC较高糖组相比,TNF-α含量显著减低(P<0.05),ICAM-1表达显著减低(P<0.05)。与对照组相比,对照组+PDC组TNF-α和ICAM-1表达差异无显著性(P>0.05)。结论:1、PDC可以逆转被高糖抑制的HUVECs的细胞活性。2、PDC可以增加高糖环境下HUVECs产生的NO的含量。3、PDC可以有效拮抗高糖诱导的HUVECs TNF-α和ICAM-1水平的增高。