【摘 要】
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[目的]本研究旨在探讨芍药苷能否调节支气管上皮细胞系16HBE表达HBD-2及其相关的信号通路。[方法]1.CCK8法测定不同浓度芍药苷作用下16HBE细胞活性。2.实时荧光定量RT-PCR测
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[目的]本研究旨在探讨芍药苷能否调节支气管上皮细胞系16HBE表达HBD-2及其相关的信号通路。[方法]1.CCK8法测定不同浓度芍药苷作用下16HBE细胞活性。2.实时荧光定量RT-PCR测试芍药苷刺激16HBE细胞HBD-2mRNA的动力学表达。3.免疫印迹法(Western Blotting)测定芍药苷刺激16HBE细胞后p-ERK、ERK、p-P38MAPK、P38MAPK和p-JNK、JNK表达水平。4细胞免疫荧光法检测芍药苷刺激16HBE细胞后NF-κB核转位情况。5.实时荧光定量RT-PCR及酶联免疫吸附法(ELISA)分析PD98059(ERK抑制剂),SB203580(P38抑制剂),SP600125(JNK抑制剂),PDTC(NF-κB抑制剂)对芍药苷诱导16HBE细胞HBD-2表达及释放的影响。[结果]1.浓度在100μM以下芍药苷对16HBE细胞无毒。2.芍药苷诱导16HBE细胞HBD-2mRNA表达具有时间和剂量依赖关系。3.芍药苷可显著诱导16HBE细胞ERK,P38MAPK, JNK磷酸化。4.芍药苷可刺激NF-κB核转位。5.PD98059,SB203580,PDTC显著抑制芍药苷诱导的16HBE细胞HBD-2生成及释放,而SP600125的抑制作用不明显。[结论]芍药苷通过激活16HBE细胞的MAPK通路中的ERK, p38及NF-κB信号途径显著诱导支气管上皮细胞系16HBE表达及释放HBD-2。中药芍药苷通过增加内源性抗感染物质β防御素2表达,增强特异性和非特异性免疫功能,从而发挥抗感染重要作用。
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