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西红花（Crocus sativus L）在临床上的应用已有几千年的历史,具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神等功效。常被用于治疗经闭症瘕、产后瘀阻、温毒发斑、忧郁痞闷、惊悸发狂等症。现代《中药大辞典》载其“活血化瘀、解郁开结之功效,主治胸膈痞闷、忧思郁结、吐血、伤寒发狂、惊悸恍惚、妇女经闭、产后瘀血腹痛、跌扑肿痛。”西红花中含有150多种化合物,其中西红花苷（crocin）是其主要有效成分之一。近年来,越来越多的研究表明,西红花苷具有降血压、降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗抑郁、增强记忆、抗粥样动脉硬化及神经和心脏保护作用。实验研究证明,西红花苷具有抑制豚鼠心肌收缩的药理作用。钙通道电流是细胞动作电位的重要电流,在形成动作电位的平台期和兴奋-收缩偶联方面起重要作用。L型钙通道（L-type calcium channel,LTCCs）主要存在于肌细胞和分泌细胞中。心肌细胞的收缩是由于心肌细胞的兴奋而引起LTCC的开放,外钙内流,胞质内钙离子浓度升高,并通过钙诱导钙释放（CICR）的方式使肌质网在短时间内释放大量钙离子,从而引起心肌收缩。在病理状态下,触发钙释放则会导致心肌细胞舒张期钙浓度过高,从而形成钙超载,引起心律失常和细胞损伤。因而,钙拮抗剂的作用就是降低心肌细胞内钙浓度以改善心肌细胞的正常生理功能。电压门控性钾通道参与调解动作电位,并起到重要作用。其中延迟整流钾电流是引起心肌细胞动作电位复极的主要的外向钾电流,分为快速激活延迟整流钾电流(the rapid component of IK,IKr)和慢速激活延迟整流钾电流(the slow component of IK,IKS)。研究显示,能够诱导引发QT间期延长的药物均能在不同程度上阻断IKr。并且由于药物与心肌细胞钾离子通道蛋白的相互作用,IKr的阻滞还会引起长QT间期综合征（long QT syndrome,LQTS）。近来,制药工业普遍通过研究药物对IKr通道的作用来评价新药致心律失常的风险。近年来,尽管有文献表明crocin具有心肌保护作用,但是crocin对心肌细胞上的钙电流,延迟整流钾电流,钙瞬变和收缩力的影响的研究还未见报道。我们推测crocin是通过阻断LTCCs发挥心肌保护的作用。目的:观察crocin对心肌细胞上的钙电流,延迟整流钾电流,钙瞬变和收缩力的影响,以探究其心肌保护作用的细胞学机制。方法:通过膜片钳技术（Patch-clamp）和细胞收缩与离子浓度同步测量系统（Ion Optix）,观察crocin对大鼠急性分离的心肌细胞钙电流,钙瞬变及细胞收缩的影响。用Patch-clamp观察crocin对表达在HEK293细胞上的IKs和IKr的影响。结果:1心室肌细胞钙电流(ICa-L)的确定全细胞电压钳模式下,将钳制电压设置为-80 mv,施以-80 mv去极化至0 mv,持续200 ms,频率为0.5 Hz的去极化脉冲,记录到ICa-L。当电流稳定后,用含0.01 m M的尼卡地平（Nicardipin,Nic）的台氏液灌流,电流基本被阻断（P<0.01）,说明所测电流为钙电流。用含0.1 mM的氯化镍（NiCl2）的台氏液灌流,电流基本没变化吗,说明这些电流不是T型钙电流,用含0.01 m M的维拉帕米（Verapamil,Ver）的台氏液灌流基本阻断电流（P<0.01）,说明记录的是L型钙电流（n=5-7）。2 Crocin对心室肌细胞ICa-L的抑制作用300μM的crocin可以明显抑制钙电流。细胞外液冲洗后,钙电流可部分恢复到给药前水平。通过连续给六个不同浓度的crocin（1,3,10,30,100和300μM）后发现crocin浓度依赖性的抑制钙电流,抑制率分别为9.53±0.87%,13.04±1.03%,29.66±1.5%,39.11±1.85%,60.23±1.90%和72.20±1.54%（n=9-12）。3 Crocin对ICa-L电流-电压（I-V）关系曲线的影响通过绘制给药前,给三个浓度的crocin（3,30和300μM）以及0.01m M的维拉帕米的I-V关系曲线,发现曲线随crocin浓度的增加而逐步上移,说明crocin浓度依赖性的抑制ICa-L。然而I-V关系以及反转电位并没有明显变化。4 Crocin对心室肌细胞ICa-L稳态激活和失活曲线的影响通过绘制给药前及给不同浓度的crocin（3和30μM）后,心室肌细胞ICa-L的稳态激活和失活曲线,发现crocin对ICa-L的稳态激活和失活无显著性的作用。给药前以及各浓度crocin的激活曲线的半最大激活电压（V1/2）/斜率因子（k）分别为-10.93±0.66 m V/7.04±0.59,-8.75±0.59m V/7.23±0.53,-6.88±0.49 m V/7.53±0.44。失活曲线的V1/2/k分别为-34.22±0.09 m V/4.88±0.08,-33.27±0.17 m V/5.05±0.10,-34.05±0.14m V/5.33±0.12（n=8-10）。5 Crocin对IKs,IKr的影响300μM crocin对IKs,IKr均无明显作用,抑制率为2.70±0.8%,3.78±0.4%（P>0.05,n=6）。6 Crocin对心室肌细胞收缩与细胞钙瞬变的影响结果显示1μM crocin能够明显的抑制心室肌细胞的收缩,抑制率为44.64±2.12%,钙瞬变的峰值也下降了23.66±4.52%（P<0.05,n=6-8）。7 Crocin对心室肌细胞收缩的时间参数的影响1μM crocin明显抑制心室肌细胞收缩达峰时间的10%（Tp）及恢复基线水平时间的10%（Tr）;抑制率分别为40.92±15.83%及7.47±1.79%（P<0.05,n=6-8）。结论:在本研究中,我们探讨了crocin的心脏保护的可能机制。研究结果表明,crocin可浓度依赖性的抑制心室肌细胞ICa-L,抑制心室肌细胞收缩,降低心室肌细胞内钙离子浓度,从而发挥其心肌保护作用。并且crocin对IKs,IKr均无明显作用,说明crocin并不会引发Q-T间期延长综合征。此研究结果为crocin的进一步研究和临床引用提供了理论依据。