目的:本研究旨在通过分子伴侣蛋白的协助实现屋尘螨主要过敏原Derp2的原核可溶性表达，获得高纯度、二级结构完整及具有与人血清IgE结合免疫活性的重组Derp2过敏原蛋白，为由屋尘螨引起的过敏性疾病的临床诊断和免疫治疗奠定实验基础。　　方法:以pCold-TFM质粒（改造自pCold-TF原始质粒）为表达载体，将合成的Derp2成熟序列（GenBank登录号：FM177223.1）插入pCold-TFM载体的BamHI和EcoRI酶切位点之间以获得pCold-TFM-Derp2重组质粒，转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），以IPTG在16℃条件下进行诱导表达。融合蛋白TF-Derp2通过镍柱亲和层析、凝胶过滤层析进行纯化后，经HRV-3C蛋白酶酶切去除TF融合标签，获得游离Derp2变应原蛋白。高纯度的Derp2以阳离子交换层析方法获得，通过SDS-PAGE、多角度激光光散射方法分析Derp2变应原蛋白的纯度、溶液中聚合状态及分子量大小；采用圆二色谱仪分析重组 Derp2与屋尘螨培养基中提取的野生型Derp2(nDerp2)的二级结构的相似性，以dot-blot免疫学方法比较rDerp2和nDerp2对11例特应性皮炎患者(11例特应性皮炎患者均对屋尘螨提取物皮肤点刺试验呈阳性反应)血清IgE结合活性的差异性。　　结果:诱导表达后，重组TF-Derp2融合蛋白几乎全部以可溶形式存在于菌体破碎物离心后的上清液中；纯化1升大肠肝菌培养物可获得5mg高纯度的、可溶的rDerp2；rDerp2蛋白在PBS缓冲液中以单体的形式存在，分子量大小为14.3 kDa；rDerp2与nDerp2的二级结构基本一致，并且两者与特应性皮炎患者血清中IgE的结合活性基本一致。　　结论:本方法体系通过TF融合表达可以获得产量可观、纯度高、二级结构完整并具有良好IgE结合活性的可溶性屋尘螨主要过敏原Derp2，说明TF分子伴侣融合表达体系能促进目标蛋白Derp2的折叠、提高其可溶性及保持其免疫活性；此研究工作为重组屋尘螨过敏原Derp2的临床诊断和治疗应用奠定基础，同时也为其他难溶性蛋白的原核重组表达提供实验经验和方法参考。