目的:淀粉类物质高温加热过程中经美拉德反应产生丙烯酰胺（ACR）,长期摄入ACR可诱导机体发生氧化应激损伤,引发肝毒性、神经毒性等。目前对ACR研究集中于食品加工尽可能其减少其产生及摄入后的代谢危害,针对日常不可避免摄入ACR后如何减少造成的损伤研究较少,尤其是利用广泛存在于蔬菜水果的天然产物改善ACR诱导氧化应激损伤研究更少。多酚已被证明具有抗氧化、抗凋亡作用,是黑果枸杞中主要的活性成分,且我们前期研究发现黑枸杞多酚（LRP）可改善氧化还原状态,保护ACR诱导细胞的神经毒性。因此,本研究拟通过建立体内体外模型,探讨LRP对ACR诱导SD大鼠肝脏、大脑氧化应激损伤的保护作用及相关机制;基于Nrf2、JNK/p38调控SH-SY5Y细胞的氧化损伤,研究LRP改善ACR诱导氧化应激损伤、细胞凋亡的机制。为改善摄入ACR诱导肝毒性及神经毒性提供新思考角度,有利于黑果枸杞深度开发。方法:建立ACR诱导的大鼠氧化应激损伤模型。将48只大鼠随机分为6组,每组8只,分别为:空白对照组（生理盐水）、LRP阳性对照组（200 mg/kg/d）、ACR 组（40mg/kg/d）及低、中、高剂量 LRP（50、100、200 mg/kg/d）+ACR（40mg/kg/d）干预组（均采用灌胃的方式）。染毒期间定期进行大鼠体重及步态评分的测定,染毒12天后处死动物。1.探讨LRP对ACR诱导肝脏氧化应激损伤的保护作用:观察大鼠肝脏组织形态及超微结构,测定血清ALT、AST及氧化应激指标、肝脏线粒体ATP酶活力,采用qRT-PCR检测肝脏线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（Complex Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）的mRNA表达水平;2.探讨LRP对ACR诱导大脑氧化应激损伤的保护作用:对大鼠进行步态评分,生化试剂盒测定大鼠脑组织GSH、MDA、SOD、ROS水平,Western blot法检测Nrf2通路抗氧化蛋白GCLC、GCLM、HO-1及凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达水平;3.利用ACR诱导SH-SY5Y细胞建立神经损伤模型,进一步探讨LRP对A C R诱导细胞氧化应激损伤的保护作用机制。采用C C K-8法检测细胞存活率、采用 qRT-PCR检测细胞Nrf2、Ho-1、Nqo1的 mRNA 表达水平、Western blot法检测Nrf2通路下抗氧化蛋白GCLC、GCLM和HO-1、凋亡相关蛋白JNK、P38、Caspase-3的表达水平并用si-RNA技术沉默Nrf2表达,观察各蛋白表达水平,验证Nrf2的关键作用。结果:1.ACR诱导SD大鼠肝脏氧化应激损伤,LRP预处理后,肝脏GSH、SOD水平升高,AST、ALT活性降低,ROS、MDA水平降低。同时,肝脏线粒体ATP酶活性、线粒体复合体Ⅰ、Ⅲ mRNA表达量均不同程度升高。结果表明LRP有抗氧化作用,可以保护细胞线粒体正常功能;2.ACR诱导SD大鼠脑组织氧化应激损伤,LRP预处理后,大鼠步态障碍有所缓解,脑组织GSH、SOD水平升高,ROS、MDA水平降低,其HO-1、GCLC、GCLM蛋白水平较ACR组均不同程度升高。同时,Bax蛋白表达量增加,Bcl-2则降低。结果表明LRP可以通过激活Nrf2相关通路发挥抗氧化作用来抑制A C R诱导的氧化损伤及凋亡;3.LRP预处理SH-SY5Y细胞后,Nrf2及其通路下游抗氧化基因GCLC、GCLM与HO-1的蛋白表达水平上升,LRP加ACR干预SH-SY5Y细胞后,提高了细胞活力,ROS水平下降,通过抑制JNK/p38、Caspase-3相关蛋白通路来发挥保护作用。同时,si-RNA沉默Nrf2表达,反向验证了LRP保护机制中Nrf2因子的关键作用。结果表明LRP通过Nrf2通路及JNK/p3 8通路来降低ACR导致的SH-SY5Y氧化应激和细胞凋亡。结论:1.LRP可以通过其良好的抗氧化作用,保护ACR诱导的肝毒性和神经毒性。2.LRP通过激活Nrf2信号通路和抑制JNK/p38凋亡信号通路,在体内体外对ACR诱导的神经毒性发挥保护作用。