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目的:本研究的目的在于揭示弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中PD-L1与p-AKT表达之间的关系,并阐明其与患者预后的相关性;同时初步探索PD-1/PD-L1除了诱导肿瘤细胞参与免疫逃逸之外,是否可直接激活DLBCL肿瘤细胞内癌基因信号传导通路PI3K/AKT/m TOR。以期探讨DLBCL新的发病机制并为DLBCL患者的临床治疗提供新的思路,从而改善DLBCL患者的预后。方法:采用免疫组化方法检测PD-L1和p-AKT蛋白在DLBCL患者中的表达情况,并收集患者完整的临床病例资料。随后采用统计学软件SPSS17.0进行相关性及生存分析。体外实验,选用五株DLBCL细胞系,分别采用Western Blot和流式细胞仪方法检测总PD-L1和细胞膜上PD-L1(m PD-L1)的表达情况。随后采用重组人PD-1/Fc蛋白多肽刺激高表达PD-L1的DLBCL细胞系0h、24h和48h后,应用Western Blot方法检测DLBCL细胞系内PDK1(Ser241)、AKT(Ser473)、AKT(Thr308)、m TOR(Ser2448)总蛋白及其磷酸化水平的变化情况。结果:我们收集了100例2008.1-2011.12在我院确诊为DLBCL患者的病理组织及完整的临床病例资料;随访截止时间为2015年6月,中位随访时间是52.4月(范围:1.5–89.1月)。免疫组化染色结果显示,PD-L1和p-AKT蛋白在DLBCL组织中呈高表达,表达率分别为54%(54/100)和48%(48/100);其中PD-L1和p-AKT共表达率为32%。Spearman相关性分析显示,PD-L1和p-AKT表达存在显著相关性(R=0.244,χ2=5.962,P=0.017)。二者表达与患者临床特征(性别、年龄、病理类型、临床分期、IPI评分和化疗方案)之间的相关性分析显示,PD-L1表达与病理类型相关,在non-GCB亚型的DLBCL中表达较高(χ2=5.260,P=0.026);而p-AKT表达与年龄相关,在年龄≥60岁患者中表达较高(χ2=5.702,P=0.027)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,PD-L1和p-AKT阳性表达患者的3年或5年OS较二者阴性表达皆显著性差,且差异具有统计学意义(P<0.05);而PD-L1和p-AKT共表达患者的3年和5年OS较二者双阴性和单阳性表达显著性差,且差异具有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,年龄(χ2=5.963,P=0.015)、病理类型(χ2=4.823,P=0.028)、临床分期(χ2=9.470,P=0.003)、IPI评分(χ2=7.645,P=0.006)、化疗方案(χ2=5.825,P=0.016)、PD-L1表达(χ2=8.945,P=0.003)、p-AKT表达(χ2=9.246,P=0.002)、PD-L1及二者共表达(χ2=13.992,P<0.001)皆是DLBCL患者的不良预后因素。Cox多因素分析结果显示,临床分期[HR(95%CI)=3.726(1.273–10.902),P=0.016]、化疗方案[HR(95%CI)=3.564(1.378–9.217),P=0.009]、PD-L1表达[HR(95%CI)=4.740(1.097–20.477),P=0.037]和p-AKT表达[HR(95%CI)=6.2205(1.244–30.949),P=0.026]是皆DLBCL患者的独立不良预后因素。Western blot和流式细胞仪检测结果显示,所选5株DLBCL细胞系皆高表达总PD-L1和m PD-L1。经重组人PD-1/Fc蛋白多肽刺激五株DLBCL细胞系24h和48h后,不同细胞系中PDK1(Ser241)、AKT(Ser473)、AKT(Thr308)和m TOR(Ser2448)磷酸化水平都有不同程度的升高。结论:1.DLBCL患者中PD-L1和p-AKT蛋白呈高表达;PD-L1表达与DLBCL的病理类型相关;p-AKT表达与DLBCL患者的年龄相关。2.DLBCL患者中PD-L1和p-AKT的表达之间存在显著相关性。3.PD-L1和p-AKT阳性表达患者的3年或5年OS较二者阴性表达皆显著性差,且差异具有统计学意义;PD-L1和p-AKT共表达患者的3年和5年OS较二者双阴性和单阳性表达显著性差,且差异具有统计学意义。4.年龄、病理类型、临床分期、IPI评分、化疗方案、PD-L1表达、p-AKT表达及二者共表达皆是DLBCL患者的不良预后因素;其中临床分期、化疗方案、PD-L1和p-AKT表达是DLBCL患者的独立不良预后因素。5.PD-1/PD-L1通路可能直接激活DLBCL细胞系中PI3K/AKT/m TOR癌基因信号通路。