论文部分内容阅读
目的:研究大容量全肺灌洗对尘肺犬的治疗机制方法:(1)12只本地健康杂种犬随机分为两组:正常对照组,尘肺犬模型组。对照组以无菌生理盐水灌肺,尘肺模型组于第1天和第20天分别向肺内灌入粉尘悬液,于灌肺第1天计时起至第60天后分别对两实验组犬进行大容量全肺灌洗术,收集灌洗回收液。(2)定量灌洗回收液后,分三部分进行实验:①取一定量灌洗回收液标本,离心处理,对沉淀物进行烘干至恒重,比较对照组和尘肺组的清除物干重与标本液量之比值;清除物经高温灰化至恒重得到粉尘含量,再次比较两组的粉尘含量与标本液量之比值。②取少量灌洗回收液,对对照组和尘肺组分别计数细胞总数,灌洗液离心得到细胞团,振散细胞团后涂片,对细胞分类(巨噬细胞、淋巴细胞、粒细胞),并计数比重;③灌洗回收液低温离心获得肺泡巨噬细胞(AM),将尘肺组和对照组稀释成同样细胞密度种植培养,培养18h后分别采用ELISA法测定每组AM培养上清液TGF-β1分泌水平;培养24h后采用Western Blot法检测AM内MMP2及MMP9蛋白含量,RT-PCR检测MMP2及MMP9的mRNA表达。结果:(1)尘肺组灌出的清除物与标本液量比值与对照组有显著差异(p<0.01),尘肺组粉尘含量与标本液量比值较对照组有明显增多(p<0.01)。(2)全肺灌洗回收液中,尘肺组细胞总数明显高于对照组(p<0.01),尘肺组肺泡巨噬细胞分类数高于对照组(p<0.05);两组间灌洗液回收率、淋巴细胞与中性粒细胞分类数无显著差异(p>0.05)。(3)分离培养的AM上清液中,尘肺组的TGF-β1蛋白含量较对照组明显升高(p<0.05);在尘肺组中, AM内MMP2、MMP9的蛋白与mRNA表达水平明显高于对照组水平(p<0.01)。结论:(1)尘肺犬模型组肺内的粉尘能被大容量全肺灌洗术清除,对防治尘肺病起到一定作用。(2)大容量灌洗能洗脱尘肺犬模型肺内大量炎症细胞,特别是对AM的的大量洗出起到阻止和延缓尘肺病的病情进展的作用。(3)表达于AM内的部分炎症因子的有效清除也说明大容量全肺灌洗对尘肺病治疗的有效性。