牛奶中抗生素及三聚氰胺残留的竞争检测方法与实验

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本研究采用基于表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance-SPR)技术的生物传感器检测牛奶中抗生素和三聚氰胺残留量,主要围绕检测中的几项关键技术问题进行研究,并通过对多种抗生素和三聚氰胺残留物的检测实验验证方法的可行性。首先,针对检测对象—抗生素和三聚氰胺均为小分子的特点,提出采用竞争法进行检测。论文对检测技术中的几项具体方法进行了研究,包括:配体的选择、配体在传感器表面的固定方法、样品预处理方法、测量方法、传感器再生方法等等。其次,论文从温度、流速、pH值、离子强度和配体浓度五个方面探讨实验条件对配体固定的影响。实验结果表明在温度为25℃,流速为5μL/min条件下,pH值为4.5,离子浓度为10mM,配体浓度为400μg/mL的实验条件下,配体的固定效果最佳,可以保证足够的配体固定量,进而实现更高的检测精度和更低的检测限。并且,采用缓冲液配置抗生素和三聚氰胺溶液进行实验研究,采用3个SPR传感器分别固定BSA—卡那霉素、BSA—氨苄青霉素、BSA—三聚氰胺用于三种残留物的测量。结果表明,三种残留物的最低检出限(LOD)分别为25ng /mL(MRL为150ng/mL)、1.7ng/mL(MRL为4ng/mL)、100ng/mL(MRL为1000 ng/mL),均远远低于欧盟规定的抗生素最大检出量和我国规定的三聚氰胺最大检出量,验证了检测方法的可行性。最后,针对牛奶中抗生素和三聚氰胺的检测会受到牛奶中其他成分非特异性绑定影响的问题,提出了解决方法,对牛奶进行预处理,去除了牛奶中存在的大分子物质。对卡那霉素、氨苄青霉素和三聚氰胺的牛奶样品进行了检测,结果表明三种残留物的最低检测限分别为30ng/mL,1.8ng/mL,110ng/mL,与水溶液检测结果比较接近,均低于欧盟规定的抗生素最大检出量和我国规定的三聚氰胺最大检出量。因此,论文通过对多种抗生素和三聚氰胺的检测实验,验证了检测方法的可行性。本研究为表面等离子体共振生物传感器在牛奶中抗生素和其他有害残留物检测领域中的应用提供了借鉴。
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