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目的:探讨二丁颗粒对高尿酸血症小鼠的影响;采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)对二丁颗粒水提取物的主要化学成分及血中移行成分进行分析鉴定;建立HPLC法同时测定二丁颗粒(紫花地丁、蒲公英、板蓝根和半边莲)中的单咖啡酰基酒石酸、秦皮乙素和菊苣酸的含量。 方法:将小鼠随机分成3组,分别为正常组、正常模型组和给药模型组,给药组给25g/kg生药材剂量二丁颗粒提取物,正常组给予等量的生理盐水,连续给药5天。最后一天给药前1h模型组均腹腔注射氧嗪酸钾盐,给药1h后从小鼠眼眶后静脉丛进行采血测血浆中尿酸水平;采用Welch C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,体积流量为0.35mL/min,质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正负离子模式下采集二丁颗粒药材和给药血浆;采用COSMOSIL C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,体积流量1mL/min,柱温30℃,检测波长为336nm测定3中活性成分含量。 结果:正常组、模型组和给药组分别为175.94±30.13μmol/L、271.10±42.01μmol/L和211.94±26.57μmol/L。模型组高于正常组,给药模型组低于正常模型组;通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定225个化合物的结构,其主要化学成分为香豆素及其衍生物、黄酮及其苷类、生物碱、有机酸、倍半萜类、木质素类等。其中大鼠灌胃二丁颗粒后血中共发现12个入血成分,其中7个二丁颗粒中原形成分,5个为原形药物的代谢产物;单咖啡酰基酒石酸、秦皮乙素和菊苣酸标准曲线分别在0.0020~0.0406μg(r=0.9999)、0.0307~0.6130μg(r=0.9999)和0.0028~0.0563μg(r=0.9999)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为100.2%、99.7%、100.4%,RSD分别为1.7%、0.88%、1.3%。 结论:二丁颗粒具有显著的抗高尿酸血症的作用;利用UHPLC的高效分离能力和MS的高灵敏度检测优势,建立了一种基于UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS的定性分析方法,为控制二丁颗粒的质量、稳定其临床疗效及阐释其作用机制提供了科学依据;所建立HPLC方法操作简便、准确,可作为二丁颗粒的质量控制标准。