猪毛菜提取物活性研究及泡腾片的研制

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目的:猪毛菜是一种藜科多年生草本植物,广泛分布于中国各地区,在民间一直用来治疗高血压。据《安徽中草药》记载,猪毛菜可治习惯性便秘,但目前对于该方面的研究较少。本课题主要研究猪毛菜提取工艺及促胃肠动力和抗氧化作用,并制备猪毛菜泡腾片。方法:采用乙醇回流法提取猪毛菜,以液料比、乙醇浓度、回流温度、回流时间为单因素考察对猪毛菜提取物得率的影响,并进一步采用响应面法优化提取工艺,确定最佳提取工艺条件;采用最佳提取工艺条件获得猪毛菜乙醇提取物,并顺序用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,获得相应的提取物,检测不同提取物对正常大鼠胃排空和小肠推进及离体胃平滑肌条收缩活动的影响,确定主要活性部位;观察乙酸乙酯提取物对阿托品和肾上腺素致胃肠动力障碍大鼠胃排空和小肠推进及离体胃平滑肌条收缩活动的影响,并用ELISA测定乙酸乙酯提取物对正常大鼠血浆中胃动素、胃饥饿素和胃泌素分泌的影响,探讨其促胃肠动力的作用机制;通过羟基自由基、超氧阴离子自由基清除及还原力实验,观察猪毛菜不同提取物的抗氧化作用;以猪毛菜乙酸乙酯提取物为主药,采用酸碱分开湿法制粒,以泡腾片崩解时限、p H值、发泡量及感官评价为指标,通过正交试验优化泡腾片配方。结果:猪毛菜的最佳提取工艺条件为液料比20m L/g,乙醇浓度70%,回流时间2.25h,在此工艺条件下,提取物得率为13.56%;猪毛菜乙酸乙酯提取物对正常大鼠胃排空和小肠推进的作用最为明显,胃排空和小肠推进率分别为67.67±3.85%和74.15±3.12%(与生理盐水组相比,P<0.01;与阳性药相比,P>0.05);猪毛菜乙酸乙酯提取物可以改善顺铂导致的胃肠运动迟缓,胃排空率可由40.07±2.55%增加至50.86±3.15%,小肠推进率可由50.58±3.13%增加至56.48±3.14%(与生理盐水组相比,P<0.01);猪毛菜乙酸乙酯提取物可以抵抗阿托品致胃肠动力障碍大鼠的胃排空和小肠推进(P<0.01),但不能抵抗肾上腺素致胃肠动力障碍大鼠的胃排空和小肠推进(P>0.05);猪毛菜乙酸乙酯提取物可使大鼠血浆中ghrelin和gastrin水平增加(P<0.01和P<0.05),但不能使motilin水平增加(P>0.05);猪毛菜乙酸乙酯提取物对大鼠离体胃平滑肌条的收缩作用最为明显(与生理盐水组相比,P<0.01);猪毛菜乙酸乙酯提取物均可显著改善阿托品和肾上腺素引起的胃平滑肌舒张(P<0.01);猪毛菜提取物具有一定的抗氧化作用,0.5mg/m L乙酸乙酯提取物的羟基自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和还原力分别为77.94±3.26%、65.94±3.95%和0.83±0.05,清除率仅次于维生素C(Vc),还原力与Vc相当;猪毛菜泡腾片的最佳配方为猪毛菜添加量12.0%,泡腾剂添加量45%,其中酒石酸与碳酸氢钠的质量比1︰2.5,阿斯巴甜添加量2.0%,制备的泡腾片中总黄酮的含量为10.16±0.25 mg/g。结论:猪毛菜提取物具有促胃肠动力及抗氧化作用,乙酸乙酯提取物为主要活性部位;猪毛菜促胃肠动力作用机制并不是单一的,其可能通过影响M-胆碱能受体和肾上腺素能受体途径及通过提高血浆ghrelin和gastrin含量来促进大鼠胃肠运动;猪毛菜泡腾片的配方简单可行,重复性好,制得片剂符合泡腾片的要求。
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