目的:探究动物体内外实验中酒精暴露是否通过影响Wnt信号通路的抑制剂Dkk-1来改变骨组织的成骨和成脂的表达。方法:提取SD大鼠原代骨髓间充质干细胞鉴定并培养,诱导成骨和成脂分化后依浓度梯度(0mmol/L、10mmol/L、50mmol/L、100mmol/L)乙醇暴露干预,应用WB技术检测Dkk-1及Wnt通路中β-catenin和下游中成骨、成脂相关蛋白含量的表达。用si D kk-1慢病毒转染骨髓间充质干细胞,并在乙醇暴露下继续成骨、成脂培养。继续应用W B技术观测目的蛋白及下游蛋白表达的变化情况。取30只4-6周龄的SD大鼠分两组,一组进行食用级酒精(乙醇浓度为56°)灌胃造模,另一组以生理盐水灌胃做对照组。在24周末每组随机抽取10只大鼠取出股骨头组织,进行HE染色、免疫组化、免疫荧光实验。观察组织病理学改变及组织内目标蛋白和下游相关蛋白的变化情况,最后进行体内外免疫荧光证明是否存在一致性。结果:(1)成功提取大鼠骨髓间充质干细胞,并在成骨、成脂诱导分化中进行乙醇暴露,茜素红染色和油红O染色证明成骨、成脂表达呈已经浓度梯度依赖性,两者反向传递。WB检测发现Dkk-1存在乙醇浓度梯度依赖性(P<0.05),并抑制β-catenin蛋白表达、成骨相关蛋白Runx2表达(P<0.05)和促进成脂相关蛋白PPAR-γ表达(P<0.05)。(2)si Dkk-1慢病毒转染后,相同乙醇浓度下的Dkk-1被成功抑制,并且细胞染色结果及成骨、成脂相关蛋白表达结果逆转。(3)24周后动物实验采取,HE染色病理结果见骨小梁稀疏,周围骨髓坏死,酒精组中Dkk-1高表达(P<0.05)。免疫组化及免疫荧光结果与体外实验相一致,且酒精组中体内外实验β-catenin均被抑制(P<0.05)。结论:(1)在酒精暴露下,Wnt信号通路抑制剂Dkk-1对乙醇存在正向浓度依赖性改变。(2)酒精引发Dkk-1的改变可以影响骨髓间充质干细胞和股骨头中骨组织的成骨、成脂能力,即抑制成骨分化,刺激成脂分化。(3)在应用动物模拟酒精性股骨头坏死的发生过程中,Dkk-1可能参与了股骨头坏死的发生及发展。