麦冬多糖的酶法水解及其产物的分离制备

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本论文对麦冬粗多糖进行分离纯化,得到多糖组分OPF-1,在分析麦冬多糖OPF-1单糖组成的基础上,对其一级结构进行了初步研究,并利用生物酶法水解麦冬多糖OPF-1,对其水解产物的成分进行相关分析。采用水提醇沉法得到麦冬粗多糖,Sevage法除蛋白后经葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱分离纯化得到麦冬多糖OPF-1。经薄层层析、凝胶柱层析及紫外光谱扫描鉴定,OPF-1为均一的多糖组分。运用完全酸水解和HPLC法对麦冬多糖OPF-1的单糖组成进行分析,确定了OPF-1的单糖组成主要是果糖和葡萄糖。由标准曲线可得在进样量为20μL的酸解液中,果糖浓度为1.671 mg/mL、葡萄糖浓度为0.116 mg/mL。由此确定了麦冬多糖OPF-1中果糖与葡萄糖之间的摩尔比为16:1。通过高碘酸氧化、Smith降解、GC、R等方法对OPF-1的化学结构进行了研究。结果表明,麦冬多糖OPF-1为果聚糖,其相对分子质量约为48 kDa,主要由2→1或2→6糖苷键连接的呋喃型果糖组成。该多糖中含有的少量葡萄糖,可能连接在多糖的还原性末端。使用Absidia sp.O8s菌产酶水解麦冬多糖OPF-1,产物经Sephadex G-100和SephadexG-50柱分离,得到OP-1、OP-2、OP-3三种麦冬多糖组分,经凝胶过滤法测定,其相对分子质量分别约为32 kDa、9 kDa、1 kDa。通过HPLC法对酶解产物进行进一步成分分析,确定了OP-1、OP-2、OP-3三种组分的单糖组成分别为果糖、果糖、葡萄糖和果糖。结果表明,Absidia sp.O8s菌产酶能部分水解麦冬多糖,使相对分子质量较大的麦冬多糖降解,得到了相对分子质量小于1万的多糖组分。
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