Daintain (大炎肽)是20世纪90年代发现的新巨噬细胞因子，是IFN-γ诱导而产生，分子量17 kDa，定位于胞浆，具有钙离子结合能力的炎症支架蛋白。Daintain基因定位于人6号染色体组织相容复合体Ⅲ（MHCⅢ）区，MHCⅢ含有多种与免疫应答相关的基因，暗示Daintain在免疫应答中发挥重要作用。目前关于Daintain在体内的生理功能还未研究清楚，但是研究发现其参与多种炎症疾病的发生和发展，包括器官移植排斥，中枢神经系统损伤和多种自身免疫性疾病等，可以肯定Daintain在单核巨噬细胞发挥免疫应答过程中起重要的作用。17-β-雌二醇（E2）是一个重要的免疫调节剂，调节多种细胞因子的表达。但E2对Daintain表达的调节作用未有报道。本文首先以巨噬细胞系RAW264.7为模型，探讨E2对Daintain的调节作用及可能的分子机制，已取得主要研究成果如下：　　 ⑴通过RT-PCR和Western Blot方法检测E2对Daintain的调节作用，在生理浓度范围（10-10 M-10-7 M）的E2能显著上调Daintain mRNA和蛋白水平的表达，且在10-10 M-10-8 M内是剂量依赖性的调节方式。虽然E2在10-7 M浓度时诱导Daintain的表达量比10-8 M低，但是仍高于对照组。　　 ⑵RAW264.7细胞组成性地表达有功能性的雌激素受体α（Erα），不表达雌激素受体β（Erβ）。雌激素受体抑制剂ICI 182780能抑制E2诱导的Daintain的表达，说明Erα参与到这个过程中。　　 ⑶LPS单独或者与E2协同对Daintain的表达无调节作用，暗示Daintain直接由激素调控表达，与一般的炎症因子不同。　　 ⑷提取单核巨噬细胞系RAW264.7基因组DNA，以其为模板采用PCR方法克隆出Daintain基因5’端UTR区1.6 kb DNA序列，将该序列同源重组到pGL3-Basic 载体上，成功构建含有Daintain基因启动子的荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic-DT(-1572_+59)。进一步通过酶切pGL3-Basic-DT(-1572_+59)，回收载体、连接，成功构建载体pGL3-Basic-DT(-1286_+59)，pGL3-Basic-DT(-794_+59)和pGL3-Basic-DT(-595_+59)。Daintain基因启动子的荧光素酶报告载体为进一步研究Daintain转录调控作用提供了载体资源。　　 ⑸通过检测荧光素酶活性，发现E2对载体pGL3-Basic-DT(-1572_+59)具有激发活性。5’端剪切Daintain基因启动子后，发现E2对载体pGL3-Basic-DT(-1286_+59)活性最大，而对载体pGL3-Basic-DT(-794_+59)和pGL3-Basic-DT(-595_+59)没有活性。说明Daintain基因启动子区-1286 bp至+59 bp内含有E2调节的活性区域。　　 本文研究了过表达Daintain对RAW264.7细胞增殖和细胞周期的影响，及其对LPS诱导RAW264.7细胞的吞饮能力和抗原递呈表型变化的影响。已取得的主要研究结果如下：①成功建立真核稳定转染过表达Daintain的RAW264.7细胞株。②发现过表达Daintain促进RAW264.7细胞更多的进入S期，G1期细胞减少，进而加快细胞周期，促进细胞增殖。③发现过表达Daintain可能通过促进LPS诱导RAW264.7细胞中NF-кB活性的增强，进而促进LPS诱导RAW264.7细胞的吞饮能力，以及促进LPS诱导RAW264.7细胞向树突状细胞形态的分化，促进表面抗原分子MHCⅡ和CD86的上膜量。以上研究表明E2对通过调节基因启动子活性来调节Daintain的表达；Daintain促进RAW264.7细胞增殖，吞饮以及向树突状细胞分化的潜能。