microRNA-106b-5p-Rab10在急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

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目的microRNA是小的内源性RNA,具有转录后抑制蛋白质编码基因表达的能力。现有研究表明,microRNA作为多种病理生理过程的主调节因子在肿瘤发生和进展方面起到重要作用。本研究旨在通过测定AML患者及健康供者骨髓中microRNA-106b-5p和Rab10 mRNA以及外周血中Rab10蛋白的相对表达量,分析microRNA-106b-5p、Rab10 mRNA和Rab10蛋白在健康供者与AML患者之间以及在AML患者初诊、复发和完全缓解阶段间表达水平的差异性,结合microRNA-106b-5p的表达水平与AML初诊患者临床特征及指标之间的相关性分析,为AML的诊断、疗效和预后评估提供新的生物学标志。方法2020年6月至2021年12月于青岛大学附属医院收集共100例骨髓及外周血标本(85例AML患者,15例健康骨髓移植供者骨髓),85例AML患者中包括初诊31例,复发14例,完全缓解40例。通过查阅住院史及复诊的方式随访到25名初诊患者病情进展情况。采用实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)方法检测骨髓标本中microRNA-106b-5p和Rab10 mRNA的相对表达量;用ELISA方法测定血清中Rab10蛋白的表达水平;评估microRNA-106b-5p和Rab10在不同组别患者中的表达差异;运用R显带技术对初诊患者进行染色体核型分析;使用Kruskal-Wallis H检验对AML患者不同疾病阶段microRNA-106b-5p和Rab10表达水平进行差异性分析;受试者工作特征曲线(ROC)用于microRNA-106b-5p和Rab10的诊断性能评价,对AML患者进行关于microRNA-106b-5p和Rab10表达水平的生存分析,以及对初诊患者microRNA-106b-5p表达水平与患者临床特征和指标间的相关性进行分析。结果qRT-PCR结果显示各组患者的microRNA-106b-5p、Rab10mRNA和Rab10蛋白的表达量均有显著差异(H=103.532,41.565,70.606,P<0.001),初诊组及复发组均显著高于完全缓解组和健康对照组(U=1~123.000,30.000~106.000,0~21.000,P<0.001)。初诊组microRNA-106b-5p、Rab10 mRNA表达水平显著高于复发组(U=93.000,564.000,P<0.001),而Rab10蛋白的表达水平在初诊组与复发组患者中无显著性差异(U=3153.000,P>0.05)。各亚型(AML-M1AML-M5)之间microRNA-106b-5p、Rab10mRNA和Rab10蛋白的表达水平无显著差异(H=5.268,1.538,8.221,P>0.05);初诊患者染色体核型的改变与microRNA-106b-5p的表达水平无相关性(P>0.05)。对初诊组中5例病人进行动态监测发现,治疗完全缓解后每位患者骨髓中microRNA-106b-5p、Rab10mRNA和外周血中Rab10蛋白的表达水平均显著降低(Z=-3.408,-3.294,-3.206,P<0.05)。miR-106b-5p的表达水平与初诊AML患者的白细胞数量显著相关(P=0.029),但与其他的临床特征及指标(性别、年龄、红细胞数、血小板数、血红蛋白含量以及骨髓原始细胞比例)无关(P>0.05)。Spearman相关性分析得出microRNA-106b-5p与Rab10mRNA、Rab10蛋白呈正相关关系(r=0.5,P<0.001;r=0.38,P<0.05)。由ROC曲线可以看出microRNA-106b-5p和Rab10蛋白均对AML有较高的诊断价值(AUC:0.944、0.853;敏感度:94.4%、97.9%;特异性:86.7%、60.0%)。经Kaplan-Meier生存曲线分析后得出microRNA-106b-5p和Rab10蛋白高表达的患者无事件生存率(指从纳入研究组开始到发生任何事件,如:治疗后病情加重、复发、死亡的时间,event free survival,EFS)小于低表达的患者(n=25,P<0.05),表明microRNA-106b-5p和Rab10蛋白低表达的患者病情稳定,预后更好。结论(1)miR-106b-5p和Rab10蛋白的表达与AML的发生、发展可能有一定相关性。(2)miR-106b-5p和Rab10蛋白的表达与AML初诊患者的白细胞数显著相关,而与AML染色体核型、亚型无关,miR-106b-5p和Rab10蛋白低表达的患者EFS长,病情稳定,预后可能更好。(3)miR-106b-5p与Rab10蛋白的表达具有相关性。(4)miR-106b-5p和Rab10蛋白可以作为AML诊断、治疗及判断预后的生物学标志物。
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