[目的]以滇重楼皂甙Ⅱ为对照,通过检测细胞增殖抑制、细胞形态、周期和凋亡,探讨滇重楼皂甙Ⅴ对白血病K562细胞的影响。[方法]1.取培养好的K562细胞,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,电镜下观察细胞形态的差异；2.取培养好的K562细胞,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,设置5个浓度梯度：1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml,取4个时间点：24小时、48小时、72小时、96小时,观察药物对细胞的增殖和抑制作用。3.取培养好的K562细胞,加入滇重楼皂甙Ⅴ,设置4个浓度梯度：2.5ug/ml,5μg/ml,7.5μg/ml,10μg/ml,观察滇重楼皂甙Ⅴ对细胞周期抑制的最佳药物浓度,并以此浓度为标准,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,设置5个时间点：0小时、24小时、48小时、72小时、96小时,观察两种药物对K562细胞G2/M期的影响。4.根据前研究中的最佳药物浓度,分别加入滇重楼皂甙Ⅴ和滇重楼皂甙Ⅱ,设置5个时间点：0小时、24小时、48小时、72小时、96小时,观察两种药物对K562细胞凋亡的影响。[结果]电镜观察：空白组(未加入药物组)细胞呈弥散均匀的蓝色荧光,细胞光滑,轮廓清晰。少见坏死细胞。对照组(重楼皂甙Ⅱ)可见细胞体积较小,核固缩呈深蓝色,形态不规则，染色质边际,且可见大量凋亡小体存在。实验组(重楼皂甙V)和对照组相比,细胞体积稍大,核固缩呈深蓝色,较对照组少,形态稍不规则,染色质边际,凋亡小体较对照组少。细胞增殖抑制实验：24小时：重楼皂甙V在1μg/ml和2μg/m1时,K562细胞细胞仍然处于增值状态,不能有效抑制细胞生长。当浓度超过3μg/m1以上,对K562细胞具有抑制作用,但不及重楼皂甙Ⅱ的抑制效果。在剂量超过3μg/m1后实验组和对照组比较没有统计学意义(P=0.839)。48小时：各剂量点均对K562细胞产生抑制作用,药物浓度越高,抑制作用越强,实验组各药物浓度比较p=0.01,对照组各药物浓度比较p=0.009,具有显著性差异。各药物剂量点实验组抑制K562细胞的作用均较对照组弱,经检验高剂量3μg/m1,4μg/m1,5u g/m1三个剂量点P<0.05,差异有统计学意义。低剂量1μg/m1,2μ g/ml两个剂量点P>0.05,可认为在低剂量点两者抑制作用接近。72小时：实验组各剂量点均对K562细胞产生抑制作用,药物浓度越高,抑制作用越强,实验组各药物浓度比较p=0.009,对照组各药物浓度比较p=0.009,具有显著性差异。各药物剂量点实验组抑制K562细胞的作用均较对照组弱,经检验高剂量3μg/m1,4u g/ml,5μg/ml三个剂量点P<0.05,差异有统计学意义。低剂量1μg/m1,2μg/ml两个剂量点P>0.05,可认为在低剂量点两者抑制作用接近。96小时：实验组各剂量点均对K562细胞产生抑制作用,药物浓度越高,抑制作用越强,实验组各药物浓度比较p=0.009,对照组各药物浓度比较p=0.009,具有显著性差异。各药物剂量点实验组抑制K562细胞的作用均较对照组弱,经检验高剂量2μg/ml,3μg/ml,4μg/ml,5μg/ml四个剂量点P<0.05,差异有统计学意义。低剂量1μg/m1剂量点P>0.05。对照组和实验组药物对K562细胞的抑制作用呈时间-剂量依耐性。药物剂量越高,抑制效果越明显,时间越长,抑制作用越大。各药物浓度之间比较具有显著性差异。细胞周期检测：重楼皂甙V药物在5ug/ml时对K562细胞G2/M期抑制效果最好,浓度增加到7.5ug/ml和10ug/m1并未增强对K562细胞G2/M期阻滞作用。实验组G2/M期比例均低于对照组,在48小时差距最大(P<0.05),0小时差距最小。0-48小时之间,G2/M期比例急剧上升,48小时达到高峰,48小时后开始下降,72-96小时下降变缓。细胞凋亡检测：实验组的凋亡率比对照组低,在48小时,两者差距最大,经统计学分析有显著性差异(P<0.01)[结论]1.滇重楼茎叶皂甙Ⅴ作用后的K562细胞比茎叶皂甙Ⅱ作用后的细胞稍光滑,轮廓稍清晰,细胞形态较规则,凋亡小体明显更少,表明滇重楼茎叶皂甙Ⅴ对K562细胞的影响比茎叶皂甙Ⅱ弱。2.滇重楼茎叶皂甙Ⅴ对K562细胞作用呈时间—效应和剂量—效应关系：时间越长,对细胞增殖的抑制效果越明显；药物浓度越大,对细胞增殖的抑制效果越明显。3.滇重楼茎叶皂甙Ⅴ对K562细胞的抑制作用不及茎叶皂甙Ⅱ且作用较茎叶皂甙Ⅱ缓慢。4.滇重楼茎叶皂甙Ⅴ对细胞周期的影响主要是阻滞在62/M期,在48小时达到阻滞高峰,但茎叶皂甙Ⅴ的作用明显弱于茎叶皂甙Ⅱ。5.滇重楼茎叶皂甙Ⅴ作用的K562细胞凋亡率明显弱于茎叶皂甙Ⅱ,在48小时两者差异最大。