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目的:通过建立复合型愤怒脑老化大鼠模型,观察愤怒情志对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)大鼠的影响,探讨愤怒情志加速脑老化的作用机理,为预防过速脑老化提供病因学依据和动物实验支持。并进一步为肝主疏泄、调畅情志及七情内伤的中医理论提供新的科学内涵和认识。 方法:选用清洁级3月龄Wistar雄性大鼠72只,体重270±10g,随机分成空白对照组、D-gal组、愤怒组、愤怒D-gal组以及入侵鼠。对D-gal组和愤怒D-gal组行颈后部皮下注射大剂量D-gal,连续6周,复制亚急性衰老及脑老化动物模型。自第3周始,对愤怒组和愤怒D-gal组采用夹尾间接刺激法引入愤怒刺激。实验第37天始用Morris水迷宫法观察各组大鼠学习记忆能力的变化,历时6天,第42天用旷场实验法对各组大鼠进行行为学观察,第43天取材并检测以下指标:①亚硝酸盐法、硫代巴比妥酸比色法、荧光法分别检测脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脂褐质(lipofuscin,LPF);②酶免法检测血清皮质酮(corticosterone,CORT)、脑组织去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT);③称重法检测脾脏指数;④光学显微镜下观察大脑皮质、海马组织形态学变化。 结果:①复合型“愤怒脑老化大鼠模型”制备成功。②与空白对照组相比,愤怒组、D-gal组与愤怒D-gal组脑SOD活性明显降低(P<0.01),MDA、LPF含量、中央格停留时间明显升高(P<0.01),空间学习记忆能力、脾脏指数明显降低(P<0.05,P<0.01);愤怒组和愤怒D-gal组旷场实验得分及垂直得分显著增加(P<0.05,P<0.01),血清CORT水平和脑NE明显升高(P<0.01),脑5-HT明显降低(P<0.01);愤怒组水平得分明显增加(P<0.05);③与D-gal组相比,愤怒D-gal组旷场实验得分、水平得分、脑MDA、LPF、NE含量和血清CORT水平明显升高(P<0.01),中央格停留时间显著增加(P<0.05),脑SOD活性、5-HT含量明显降低(P<0.01),空间学习记忆能力、脾脏指数明显降低(P<0.05);愤怒组血清CORT、脑NE、旷场实验得分、水平、垂直得分明显升高(P<0.01)。④与愤怒组相比,愤怒D-gal组SOD活性、脾脏指数明显降低(P<0.01),空间学习记忆能力明显降低(P<0.05),MDA、LPF含量明显升高(P<0.01)。⑤愤怒组和愤怒D-gal组大脑皮质和海马的组织学改变与D-gal组的拟老化改变一致。 结论:①愤怒长期积累导致正常大鼠大脑出现脑老化。②反复愤怒刺激可加重D-gal大鼠的脑老化程度,提示愤怒情志长期积累是加速脑老化进程的原因之一。③愤怒加速大鼠脑老化进程的作用机制可能是:降低脑SOD活性,增加脑MDA、LPF含量,导致脑过氧化损伤与抗氧化系统之间的平衡失调;增加血清CORT、脑NE、5-HT等激素和神经递质水平,过度激活下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和交感-肾上腺髓质(SAS)两大系统,从而影响脑的功能;加速大脑皮质和海马神经元结构出现拟老化改变。