油茶光合产物积累分配特征及运输机制

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油茶是我国南方特有木本油料树种,其经济价值高、适应性强、用处广,综合开发利用价值大。国家积极发展油茶产业,对保障粮油安全,缓解耕地压力,提高农民收入等具有重大意义。提高油茶产量与质量已成为当前迫切需要解决的关键科学问题之一,光合效率决定其产量和质量的形成。因此,阐明油茶光合产物分配、调运和储存特征,研究差异性因子,并筛选关键基因及功能,具有重要科学价值和理论意义。本文以岑软3号和湘林210两个国家审定油茶良种为研究对象,采用13C同位素标记方法,测定阐明其光合产物积累与分配特征;采用转录组测序技术获得蔗糖转运蛋白基因并验证其功能,诠释调控光合产物积累分配及运输机制,可为油茶源库调节提供理论基础,并为油茶产量及质量提升提供技术支持。主要研究成果如下:(1)光合参数特征:湘林210的光饱和点(LSP)为275.02μmol·m-2·s-1;岑软3号为263.20μmol·m-2·s-1。湘林210的光补偿点(LCP)为29.11μmol·m-2·s-1;岑软3号为26.51μmol·m-2·s-1。湘林210的最大净光合速率(Pnmax)为10.80μmol·m-2·s-1;岑软3号为14.09μmol·m-2·s-1。对岑软3号和湘林210在各时期的最大净光合速率进行测定,在整个果实发育期间,最大净光合速率呈现先上升后下降的趋势。两品种的最大值均在7月达到,分别为10.08μmol·m-2·s-1、14.09μmol·m-2·s-1;最低值出现6月,分别为6.57μmol·m-2·s-1、6.22μmol·m-2·s-1。(2)同化物转运特征:在6月进行13C饲喂后,随着时间的推移,岑软3号叶片丰度逐渐下降,48 h达到最小值(1.0794%);枝条丰度逐渐上升,72 h达到最大值(1.0914%);果实丰度与枝条丰度的转运特征基本一致,72 h时达到最大值(1.0823%);湘林210叶片与枝条丰度呈先上升后下降,而果实丰度呈缓慢上升,于72 h时达到最大值(1.0866%)。(3)同化物积累特征:在6月、7月、9月、10月进行13C饲喂并采样,随着果实发育进程,岑软3号叶片丰度逐渐增加,10月达到最大值;湘林210叶片丰度于9月达到最大值,10月丰度略有下降;岑软3号枝条丰度呈先下降后上升,9月达到最小值(1.0818%),湘林210与岑软3号的枝条丰度积累特征基本一致,但于7月达到最小值(1.0824%);岑软3号与湘林210的果实丰度积累特征也基本相似,均先上升后下降再微上升,两个品种最小值均出现在6月,分别为1.0823%和1.0866%;最大值均出现在7月,分别为1.0892%和1.0909%。(4)可溶性糖含量变化特征:岑软3号和湘林210的叶片可溶性糖含量变化均呈先上升后下降,最后趋于平缓,且均在7月达到最大值;果实可溶性糖含量变化呈先上升后下降再微上升,也在7月达到最大值。(5)转录组基因组装及功能诠释:通过对岑软3号和湘林210的转录组测序,共获得54,217条unigene序列,样本进行相关性检验后,生物学重复内的相关性大多数可达到0.8以上;利用多个公共数据库对每条unigene序列进行比对后,共有43,998条unigene序列能和公共数据库中的已知基因匹配,占所有非冗余基因的81.15%。在COG数据库中进行比对,共有18,600条unigene与COG数据库中的基因具有同源性,根据其功能可以分为25个类别;在与GO数据库进行比对后,共获得138,546条GO功能注释,可分为3大类50亚类;在KEGG数据库比对中,有16,798条unigene参与了130个已知的代谢或者信号通路。(6)差异表达基因筛选:通过分析岑软3号和湘林210在不同时期的差异表达基因,6月与7月、9月和10月的差异表达基因数量巨大,岑软3号中最多达11,182条,湘林210中最多达到1,1179条;而7月、9月、10月之间的差异表达基因相对较少,岑软3号中最少的为152条,湘林210中最少的为269条。随着果实发育进程,淀粉合成酶、果糖激酶、蔗糖合成酶等相关基因均出现上调,而淀粉酶、磷酸化酶等则出现下调。脂肪合成是通过淀粉代谢进行转化的,且在9月以后,油茶果实主要是进行油脂转化,因此,相关酶基因的上调与下调与果实发育进程相符。通过进一步分析筛选,共获得7个与蔗糖转运蛋白相关的基因,分别是SUC1-like、SUC2-1、SUC2-2、SUC2-3、SUC2-4、SUC2-like和SUC4。
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