拟南介转录因子NF-YA10生物学功能的初步研究

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NF-Y是一类结合CCAAT-box的重要转录因子,包括三个亚基,NF-YA、NF-YB和NF-YC。在拟南芥中已鉴定了10个NF-YA,13个NF-YB和13个NF-YC基因。NF-Y家族在植物的生长发育及逆境反应中发挥了重要调控作用并受到miR169家族成员的调控.我们对拟南芥转录因子NF-YA10生物学功能进行了初步研究。主要研究内容和结果如下:  1、构建AtNF-YA10过表达载体并转化拟南芥,获得过表达AtNF-YA10转基因拟南芥纯系,并对其表型进行研究鉴定。主要包括抗逆表型、开花表型及叶片发育表型。结果发现过表达株系在抗逆表型和开花表型上与野生型无明显差异,过表达株系有比野生型更大的莲座,说明过表达AtNF-YA10促进了拟南芥叶子的发育。  2、对过表达AtNF-YA10转基因拟南芥纯系进行生长素相关表达谱芯片分析。找出了5个与生长素相关的AtNF-YA10可能的靶基因。  3、利用雌激素诱导的转录激活系统构建雌激素诱导的转录激活系统调控的AtNF-YA10∶3×flag融合基因植物表达载体并转化拟南芥,获得转基因纯系,并对其表达外源AtNF-YA10∶3×flag蛋白的条件进行了优化。选定1/2MS培养基生长10天的雌激素诱导16h为最优的表达条件。  4、以雌激素诱导的转录激活系统调控的AtNF-YA10∶3×flag融合基因转基因纯系为材料对NF-YA10进行CHIP实验,分析通过表达谱芯片找出的生长素相关的基因是否为AtNF-YA10真正的靶基因。结果显示这5个与生长素相关的基因为AtNF-YA10靶基因的可能性不大。
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