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目的吗啡后处理心脏保护作用机制尚不完全清楚,本研究通过建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型模拟临床心肌缺血/再灌注,探讨热休克蛋白90（HSP90）/丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）通路介导吗啡后处理通过抑制补体C5a/核转录因子（NF）-κB通路对心肌缺血再灌注心脏的保护作用机制,探索吗啡治疗心肌缺血/再灌注损伤潜在的靶点,为吗啡的临床应用提供基础。方法将160只雄性SD大鼠随机分为以下8组（n=20）:1)假手术组（Sham组）:大鼠开胸,只保留缝合线,不结扎;2)缺血/再灌注组（I/R组）:大鼠开胸,先行冠状动脉前降支结扎30分钟,然后再灌注2小时;3)缺血后处理组（IPost C组）:冠状动脉前降支缺血30分钟后,进行3个循环后处理（缺血30秒,再灌注30秒）,然后再灌注2小时;4)吗啡后处理组（MP组）:再灌注前10分钟予以吗啡0.3 mg/kg尾静脉注射,然后再灌注2小时;5)MP+特异性HSP90抑制剂格尔德霉素（GA）组:在大鼠心肌缺血前10分钟腹腔注射格尔德霉素1 mg/kg,余操怍步骤同MP组;6)MP+Akt抑制剂GSK-690693（GSK）组:在大鼠心肌缺血前10分钟腹腔注射GSK 20 mg/kg,余操怍步骤同MP组;7)MP+C5a抑制剂PMX-205（PMX）组:在大鼠心肌缺血前28天通过灌胃给药PMX1 mg/kg/天,余操怍步骤同MP组;8)MP+NF-κB抑制剂EVP4593（QNZ）组:在大鼠心肌缺血前10分钟给予腹腔注射QNZ 1mg/kg,余操怍步骤同MP组。应用TTC+伊文斯蓝染色检测大鼠心肌梗死面积,TUNEL法检测大鼠心肌细胞调亡,酶联免疫法检测血清损伤性心肌酶指标包括心肌肌钙蛋白I（c Tn I）,乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶-MB（CK-MB）,实时荧光定量PCR检测白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及细胞粘附因子1（ICAM-1）的m RNA表达,应用蛋白质印迹法检测HSP90、磷酸化的Akt（phosphorylated Akt,p-Akt）、补体成分C5a及NF-κB蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组明显增加了心梗面积（0 vs.35.93±2.81%）,心肌细胞调亡（4.83±0.37%vs.36.84±3.87%）,c Tn I（0.93±0.76vs.25.17±3.29）ng/m L,LDH（454.29±23.17 vs.1458.90±243.78）U/L和CK-MB（405.16±22.47 vs.1377.32±257.88）U/L;与I/R组相比,吗啡后处理显著降低了I/R引起的心肌梗死面积（35.93±2.81%vs.20.33±2.96%）,心肌细胞凋亡（36.84±3.87%vs.19.87±0.41%）以及c Tn I（25.17±3.29 vs.12.09±1.43）ng/m L,LDH（1458.90±243.78 vs.1037.46±102.14）U/L和CK-MB（1377.32±257.88 vs.932.54±40.73）U/L。与MP组相比,HSP90抑制剂GA及Akt抑制剂GSK减弱吗啡后处理心脏保护作用[MP+GA组vs.MP组:心肌梗死面积（37.22±2.77%vs.20.33±2.96%）,心肌细胞凋亡（38.25±1.26%vs.19.87±0.41%）及c Tn I（23.88±2.01 vs.12.09±1.43）ng/m L,LDH（1447.61±178.23 vs.1037.46±102.14）U/L和CK-MB（1301.74±217.48 vs.932.54±40.73）U/L;MP+GSK组vs.MP组:心肌梗死面积（36.65±4.46%vs.20.33±2.96%）,心肌细胞凋亡（37.80±1.72%vs.19.87±0.41%）及c Tn I（23.47±1.53 vs.12.09±1.43）ng/m L,LDH（1439.04±214.35 vs.1037.46±102.14）U/L和CK-MB（1301.74±217.48 vs.932.54±40.73）U/L],而使用C5a抑制剂PMX和NF-κB抑制剂QNZ均能增强吗啡后处理的心脏保护作用[MP+PMX组vs.MP组:心肌梗死面积（10.88±1.92%vs.20.33±2.96%）,心肌细胞凋亡（12.94±3.16%vs.19.87±0.41%）及c Tn I（5.95±0.79 vs.12.09±1.43）ng/m L,LDH（767.40±31.05vs.1037.46±102.14）U/L和CK-MB（653.43±38.72 vs.932.54±40.73）U/L;MP+QNZ组vs.MP组:心肌梗死面积（9.83±1.78%vs.20.33±2.96%）,心肌细胞凋亡（12.51±2.46%vs.19.87±0.41%）及c Tn I（5.83±0.60 vs.12.09±1.43）ng/m L,LDH（762.98±27.82 vs.1037.46±102.14）U/L和CK-MB（659.60±40.10 vs.932.54±40.73）U/L]。与I/R组相比,吗啡后处理显著上调了HSP90和p-Akt的蛋白表达,同时下调了C5a和NF-κB的蛋白表达及炎症因子TNF-α,IL-1β和ICAM-1的m RNA表达,提示吗啡后处理的心脏保护是通过上调HSP90和p-Akt及抑制C5a、NF-κB、TNF-α,IL-1β和ICAM-1。此外,GA抑制了吗啡后处理对HSP90蛋白表达上调的同时,也抑制了p-Akt的蛋白表达,而GSK对HSP90的蛋白表达没有影响,表明HSP90/Akt通路介导吗啡后处理心脏保护。另一方面,C5a抑制剂PMX增强了吗啡后处理对NF-κB蛋白表达的下调,而NF-κB抑制剂QNZ对C5a的蛋白表达没有影响,并且PMX及QNZ均加强了吗啡后处理对炎症因子的m RNA表达下调,表明吗啡后处理的心脏保护作用是通过抑制C5a/NF-κB通路。最后我们进一步探讨了HSP90/Akt通路与C5a/NF-κB通路在吗啡后处理中的相互作用,结果显示,与吗啡后处理组相比,GA和GSK都上调了C5a及NF-κB的蛋白表达,PMX和QNZ对HSP90及p-Akt的蛋白表达无影响,提示HSP90/Akt通路通过抑制C5a/NF-κB通路介导吗啡后处理心脏保护作用。我们的结果为吗啡治疗心肌缺血/再灌注损伤提供潜在的靶点,为吗啡的临床应用提供基础。结论吗啡后处理介导的心脏保护可能是通过HSP90/Akt通路抑制C5a/NF-κB通路的激活以及随后的心肌炎症,最终减轻I/R引起的梗死面积和心肌细胞凋亡。