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研究背景：已有的研究证明，人体内树突状细胞（dendriticcell，DC）在许多疾病包括肺结核病中都有不同程度的改变，在不同分期肺结核患者体内DC亚群也呈现不同的变化，这些变化是否与肺结核患者体内Vδ2+γδT细胞比例（<60%）有相关性还不得知。已有的研究报导结核杆菌对DC功能有抑制作用，从结核杆菌H37Ra株提取的结核杆菌耐热性多肽抗原（Mtb-HAg）是一种能优势诱导γδT细胞活化的小分子多肽；结核杆菌H37Ra菌体超声蛋白是成分复杂的粗抗原，既包括细菌本身的结构蛋白质例如细菌的表面抗原，又包括细菌的胞浆抗原；分泌蛋白抗原是结核杆菌H37Ra株分泌性蛋白质，由细菌在生长期间释放到细菌培养液中的抗原。这三种抗原分别对DC的成熟和功能及对γδT细胞功能的调节有何作用却不清楚，负载Mtb-HAg后的DC与体外诱导的自体γδT细胞共培养后对后者分泌IL-17和IFN-γ的影响也未见报道。目的：（1）观察肺结核（PTB）患者与健康成人（HD）和其他疾病间DC亚群即髓样树突状细胞（myeloiddendriticcells，mDC)和淋巴样树突状细胞（plasmacytoiddendriticcells，pDC)的变化及与Vδ2+γδT细胞比例（<60%）的相关性；（2）观察Mtb-HAg、菌体超声蛋白抗原及分泌蛋白抗原对DC成熟性分化和对γδT细胞功能调节的影响；（3）观察Mtb-HAg诱导成熟的DC对自体γδT细胞分泌IL-17和IFN-γ的影响。方法：（1）采集36例HD、138例PTB患者、39例矽肺患者和18例间日疟患者外周静脉抗凝全血，用四色荧光抗体染色后在流式细胞仪检测和分析DC亚群即mDC(Lin-HLA-DR+CD11c+)和pDC(Lin-HLA-DR+CD123+)，根据病程进展又将肺结核患者分为初治组和复治组。（2）用健康成人外周血分离单核细胞，并在细胞因子GM-CSF、IL-4的作用下获得未成熟DC(immatureDC，imDC)；（3）用Mtb-HAg、菌体超声蛋白抗原及分泌蛋白抗原分别诱导imDC继续分化，采用流式细胞术分析不同处理的DC表面成熟性相关分子CD83、CD86、HLA-DR，非特异性成熟分子CD69，树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子（DC-specificICAM-3grabbingnonintegrin，DC-SIGN）的变化；（4）分离健康成人外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，分别在IL-2、Mtb-HAg和或IL-23、IL-1β和TGF-β的作用下体外诱导培养富含效应性γδT细胞的Mtb-HAg激活的T细胞（Mtb-AT)或富含分泌IL-17的γδT细胞的Mtb-HAg激活的T细胞。（5）上述不同抗原诱导后的DC与自体体外诱导的γδT细胞（Mtb-AT)按1:20分别共培养2d和6d后，用流式细胞术分析自体γδT细胞分泌IL-17、IFN-γ的比率和γδT细胞增殖水平（CFSE标记法）。结果：（1）PTB患者（n=138)的pDC(0.92±0.87)%显著低于HD组（n=36)(1.94±0.36)%(p<0.05)，mDC在PTB组、HD组之间无差异（p=0.96)，PTB组的mDC/pDC比值也明显高于HD组（p<0.05)。pDC和mDC的绝对值计数在两组间均无差异（p>0.05)。（2）矽肺患者（n=39)的pDC(0.71±0.57)%显著低于HD组（n=36)(1.94±0.36)%(p<0.05)，mDC在矽肺组、HD组之间无差异（p=0.13），矽肺组的mDC/pDC比值也明显高于HD组（p<0.05)。pDC和mDC的绝对值计数在两组间均无差异（p>0.05)。（3）间日疟患者（n=18）的pDC(0.34±0.43）%显著低于HD组（n=36)(1.94±0.36)%(p<0.05)，mDC在间日疟组、HD组之间无差异（p>0.05），间日疟组的mDC/pDC比值也明显高于HD组（p<0.05)。（4）PTB初治组（n=111)的pDC（0.96±0.11）%显著低于HD组（n=36)(1.94±0.36)%(p<0.05)，mDC在两组间无差异（p>0.05），PTB初治组的mDC/pDC比值也明显高于HD组（p<0.05)。（5）PTB复治组（n=27)的pDC（0.77±0.13）%显著低于HD组（n=36)(1.94±0.36)%(p<0.05)，mDC在两组间无差异（p>0.05），PTB复治组的mDC/pDC比值也明显高于HD组（p<0.05)。（6）PTB与矽肺和间日疟间以及PTB初治组（n=111)和复治组（n=27)间pDC%、mDC%和mDC/pDC及pDC和mDC的绝对值计数无明显差异(p>0.05)。（7）HD、PTB和矽肺（n=213)组γδT细胞中Vδ2低表达(<60%)病例为27例，其中检测DC亚群的有14例，pDC%、mDC%和mDC/pDC与Vδ2低表达之间的相关性均R<80%，即无相关性。（8）外周血单核细胞能在GM-CSF、IL-4诱导下分化为imDC，细胞具有典型的DC特征性形态，高表达CD11c，低表达CD14；LPS能够诱导DC成熟，其表面成熟性分子CD83、CD86、HLA-DR、CD69和DC-SIGN的表达均增加；（9）与诱导前比较：Mtb-HAg诱导的DC表面成熟性分子CD83、CD86、HLA-DR、CD69的表达均明显增高(p<0.05，p<0.01，p<0.01，p<0.05)，DC-SIGN表达无明显变化（p>0.05)；菌体超声蛋白抗原诱导的DC表面成熟性分子HLA-DR、CD69的表达均明显增高（p<0.01，p<0.01），CD83、CD86及DC-SIGN的表达无明显变化（p>0.05）；分泌蛋白抗原诱导的DC表面成熟性分子CD86、HLA-DR、CD69的表达均明显增高（p<0.01，p<0.01，p<0.01），CD83和DC-SIGN的表达无明显变化（p>0.05）；（10）与LPS诱导组比较：Mtb-HAg诱导的DC表面成熟性分子CD83、CD86、HLA-DR、CD69、DC-SIGN的表达均无明显变化；菌体超声蛋白抗原诱导的DC表面成熟性分子CD86、CD69的表达均明显增高（p<0.05，p<0.05），CD83、HLA-DR、DC-SIGN的表达无明显变化（p>0.05）；分泌蛋白抗原诱导的DC表面成熟性分子CD83、CD86、HLA-DR、CD69的表达无明显变化（p>0.05），DC-SIGN的表达明显增高（p<0.01）。（11）负载Mtb-HAg的DC分别与IL-2诱导的阴性对照组，Mtb-HAg和IL-2诱导的阳性对照组及Mtb-HAg、IL-2、IL-23、IL-1β和TGF-β联合诱导的实验组共培养2d后，与阴性对照组比，阳性对照组和实验组分泌IFN-γ的γδT细胞比率均有明显增高（p<0.01，p<0.05），分泌IL-17的比率无明显变化（p>0.05）,但IFN-γ和IL-17在阳性对照组和实验组间无明显变化（p>0.05）。（12）自体γδT细胞（未与负载Mtb-HAg的DC共培养）的IL-2组（阴性对照组）、Mtb-HAg组（阳性对照组）和Mtb-HAg+CK组(实验组）三组，与阴性对照组相比，阳性对照组和实验组分泌IFN-γ的γδT细胞比率均有明显增高（p<0.05，p<0.05），分泌IL-17的比率无明显变化（p>0.05），但IFN-γ和IL-17在阳性对照组和实验组间无明显变化（p>0.05）。（13）LPS、Mtb-HAg、菌体超声蛋白抗原和分泌蛋白抗原诱导的成熟DC分别与γδT细胞共培养6d，与未诱导组比较，刺激γδT细胞增殖指数（PI）均明显增高（p<0.01）；与LPS诱导组比较，PI在各组间均无明显变化（p>0.05）。结论：（1）与HD组相比，PTB、矽肺患者、间日疟患者DC亚群中pDC%均明显降低，而mDC变化不明显，同时mDC/pDC的比值也明显升高。（2）与HD组相比，PTB初治组和复治组DC亚群中pDC%均明显降低，而mDC变化不明显，同时mDC/pDC的比值也明显升高。但初治组和复治组间pDC%、mDC%和mDC/pDC无变化。（3）pDC%、mDC%和mDC/pDC的变化与Vδ2+γδT细胞比例(<60%)之间无相关性。（4）Mtb-HAg能上调DC成熟性表型的表达，表明Mtb-HAg具有促进DC成熟的作用；菌体超声蛋白抗原和分泌蛋白抗原能部分促进DC的活化；（5）DC-SIGN的增高表明可能与结核杆菌分泌蛋白抗原能诱导DC处于失能的半成熟状态有关。（6）Mtb-HAg、菌体超声蛋白抗原和分泌蛋白抗原诱导的DC能够促进自体γδT细胞的增殖。（7）负载Mtb-HAg后的成熟DC对自体γδT细胞分泌IFN-γ、IL-17无明显作用。