绿色木霉的筛选及秸秆的二次组合发酵

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本论文主要是对纤维素酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究,以绿色木霉的7株菌为出发菌株,通过种子培养基和发酵培养基的处理,分别测其C1、CX、CB和滤纸的酶活大小以及纤维素、木质素的降解率,来筛选出酶活力和降解率都高的优良菌株;通过绿色木霉(Trichodermaviride)和白腐真菌(white-rot fungi)的平板拮抗试验发现,需将两菌进行二步混合发酵,来降解秸秆;采用稻草麸皮比例、培养基含水量、混菌总接种量和混菌接种比例对绿色木霉(Trichoderma viride)和白腐真菌(white-rot fungi)混合发酵条件进行了优化;利用两级离体消化试验对发酵秸秆进行体外消化性的评价研究,结果如下:(1)以稻草为主要碳源时,绿色木霉化L4C和BS产CMC酶和滤纸酶的活性均为最高。分别为2438.4U/mL、2438.4U/mL和715.4U/mL、658.8U/mL;以小麦为主要碳源时,绿色木霉化L4C和BS产CMC酶和滤纸酶的活性均为最高。分别为2854.0U/mL、3237.7U/mL和880.5U/mL、865.7U/mL。(2)绿色木霉和白腐真菌混菌发酵,结果表明两菌间隔接种时间6天最为适宜,最佳组合为O6-H10,即白腐真菌接种6天后,再接种绿色木霉培养10天。(3)平菇和绿色木霉化L4C、BS在稻草培养基上的最优条件分别为:稻草与麦麸比为7:3、6:4,培养基中含水量为55%、45%,平菇和绿色木霉的总接种量为15%、25%,接种比例都为3:2。在此最佳发酵条件下,平菇和绿色木霉化L4C的半纤维素、纤维素、木质素降解率分别为36.4%、41.6%和48.1%,分别是单菌发酵的1.5倍、1.22倍、2.5倍;平菇和绿色木霉BS的半纤维素、纤维素、木质素降解率分别为31.4%、31.5%和52.9%,分别是单菌发酵的1.3倍、1.05倍、2.75倍。平菇和绿色木霉BS、化L4C在小麦培养基上的最优条件均为小麦与麸皮比例为7:3,培养基中含水量55%,总接种量为15%,接种比例为3:2。(4)利用两级离体消化试验得出,混菌发酵的干物质的消化率可达到40%~60%,比没接种的秸秆消化率提高了1.79~2.82倍。
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