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目的:本课题应用细胞培养技术,通过自拟方抑癌汤对人肺癌NCI-H446细胞株进行干扰研究,探讨其增殖抑制作用。旨在从苗药中药组方中找到抑制肺癌细胞增殖的新方法,为治疗肺癌提供一种新的治疗思路。方法:将NCI-H446细胞进行培养,绘制NCI-H446细胞生长曲线,取处在对数生长期的NCI-H446细胞进行实验。首先确定抑癌汤的作用浓度范围,将抑癌汤分为1g/ml、100mg/ml、10 mg/ml、1 mg/ml、100ug/ml、10 ug/ml、1 ug/ml、0.1ug/ml共8个浓度梯度,对照组为只加等量的细胞培养液,总共9组。每一组各设4个复孔,使用MTT法测定细胞的存活率。取细胞的存活率为50%时的药物浓度范围做为抑癌汤的给药参考浓度。再将抑癌汤在20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml、80ug/ml、100ug/ml五个浓度和在24小时、48小时、72小时这三个观测时间点上与空白组(培养基对照组)进行比较观察。最后取抑癌汤60ug/ml的浓度做为抑癌汤的给药浓度,与西药组;抑癌汤加西药组(60ug/ml浓度组并加用西药)和以只加培养液的空白对照组,共四个大组(抑癌汤组、西药组、抑癌汤加西药组、空白组),每一组各设4个复孔,进行对照研究,使用MTT法测定细胞的抑制率,以上实验均重复三次。结果:1:绘制细胞生长曲线,通过倒置显微镜下进行细胞计数,得到细胞倍增时间为26小时。2:抑癌汤对NCI-H446细胞毒实验得到细胞存活率50%时的药物浓度范围在1-100ug/ml之间,根据该浓度范围可以为细胞增殖抑制实验提供给药药物参考浓度。3:细胞增殖抑制实验:抑癌汤在20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml、80ug/ml、100ug/ml浓度和在24小时、48小时、72小时这三个观测时间点与空白组(培养基对照组)比较均有统计学差异。抑癌汤组三次实验经过统计分析得到:P=0.492,即抑癌汤组三次重复实验无统计学差异,说明实验具有可重复性。结果显示不同浓度抑癌汤作用48h对NCI-H446细胞的增殖具有明显的抑制作用,随着作用时间的延长抑制作用逐渐减弱,且随着给药剂量的增大,抑制作用增强。抑癌汤在24小时、48小时、72小时的抑制率分别达到53.47%、54.47%和10.45%。4:四个给药组之间的比较:抑癌汤组选用的中间浓度(60ug/ml)。抑癌汤加西药组与抑癌汤组;抑癌汤加西药组与西药组;抑癌汤组与西药组;抑癌汤组与空白组;抑癌汤加西药组与空白组;西药组和空白组的细胞抑制率有统计学差异。通过给药组间均数两两比较:抑癌汤加西药组优于抑癌汤组;抑癌汤加西药组优于西药组;西药组优于抑癌汤组;抑癌汤组优于空白组;抑癌汤加西药组优于空白组;西药组优于空白组并有统计学差异。结论:1:人小细胞肺癌NCI-H446细胞倍增时间为26小时,增殖快。2:结果显示不同浓度抑癌汤作用48h对NCI-H446细胞的增殖具有明显的抑制作用,随着作用时间的延长抑制作用逐渐减弱。3:抑癌汤对NCI-H446细胞随着给药剂量的增大,抑制作用增强。4:抑癌汤加西药组优于抑癌汤组;抑癌汤加西药组优于西药组;西药组优于抑癌汤组。抑癌汤在体外对人小细胞肺癌NCI-H446细胞具有抑制作用,通过理气、活血止痛、燥湿祛痰、清热解毒的方法抑制癌细胞增殖。具有潜在药用价值,值得进一步深入研究。